Toma de muestras:
En el HUC, la UTI presenta
un área común con 12 camas, además de áreas de faena, lavado, preparación de
drogas y sala de reuniones. El Servicio de Neonatología (SN) incluye la Unidad
de Terapia Intensiva Neonatal (UTIN), la Unidad de Cuidados Intermedios
Neonatales (UCIN), y el Retén, un área
común y una de lavado. Se realizó el estudio
por un periodo de 12 meses, realizando tomas de muestras cada 2 meses. Se recolectaron
muestras de varias superficies inanimadas de las diversas áreas del servicio y de
las manos del personal. Se tomaron aproximadamente 50 muestras de cada servicio
en cada toma, haciendo
uso de placas de contacto o
placas RODAC (Replicate Organism Detection and Counting), utilizando agar para prueba de contenido
microbiano o medio Agar Triptona de soya con lecitina y polisorbato 80 (Agar 15
g/L, Digestión por papaína de harina de soya 5 g/L, Hidrolizado enzimático de
caseína 15 g/L, Lecitina 0,7 g/L, polisorbato 80 5 g/L y NaCl 5 g/L).
Cepas
bacterianas
Las cepas bacterianas provenientes de pacientes fueron identificadas y
donadas por el Departamento de Bacteriología del HUC en el periodo de estudio,
coincidiendo con las fechas de los muestreos ambientales. Las muestras nos fueron entregadas manteniendo
el nombre en el anonimato para garantizar la privacidad de los pacientes. Todos
los procedimientos se realizaron de acuerdo a las normas establecidas por la
Organización Mundial de la Salud (OMS) para trabajos de investigación en seres
humanos, la declaración de Helsinki, ratificada por la 52ª Asamblea General,
Edimburgo, Escocia en el año 2000(12) y el Código de Bioseguridad y
Bioética de la República Bolivariana de Venezuela(13).
La identificación bacteriana de los microorganismos aislados del
ambiente del HUC, se realizó por baterías bioquímicas mediante los protocolos de
identificación convencionales(14), y haciendo uso del sistema automatizado ATB plus
(Biomerieux. Marcy l'Etoile, France), empleando las galerías de identificación
ID 20NE y ID32GN de la misma casa comercial.
Sensibilidad a los antibióticos
Para analizar la
susceptibilidad a los antibióticos más utilizados, se uso el método de difusión
en disco (15) siguiendo los lineamientos propuestos por el CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute).
Para P. aeruginosa y A. baumannii se emplearon los siguientes agentes
antimicrobianos: cefotaxima (30 μg), ceftazidima (30 μg), ceftriazona (30 μg),
imipenen (10 μg), meropenem (10 μg), amikacina (30 μg), piperacilina tazobactam
(100/10 μg), tobramicina (30 μg), cefepima (30 μg), gentamicina (10 μg),
tetraciclina (30 μg), ampicilina (10 μg), ciprofloxacina (5 μg) y amoxacilina
ácido clavulánico (2:1) (30 μg), trimetoprin sulfametoxazol (25 μg),
exceptuando este último para P.
aeruginosa. En cuanto a las cepas de S.
maltophilia, se emplearon levofloxacina (5 μg) y trimetoprin sulfametoxazol
(25 μg).