Fisiología
Los conceptos básicos de fisiología renal en evaluaciones sumativas de los estudiantes de segundo año de medicina de la Escuela Luis Razetti. Universidad Central de Venezuela.
Apéndice B
TOMADO DE: Rivas M, D´Alessandro A, Domínguez J, Villalobos J, Díaz E, Blanco A, García A. Manual de prácticas de
Fisiología normal. Año académico 2011-2012.
Actividad práctica13: Filtración Glomerular y mecanismos de dilución y
concentración de la orina. Cátedra de Fisiología normal. Escuela “Luis Razetti”. Facultad de Medicina. Universidad Central
de Venezuela. Caracas, Venezuela; 2011-2012. p. 33-37.
PRÁCTICA DE
LABORATORIO DE FISIOLOGÍA RENAL
Actividad Práctica de
Fisiología Renal. 2011-2012
La actividad práctica de Fisiología Renal es la Nº12 y se denomina
Actividad Práctica Experimental “Filtración
y Mecanismos de Dilución y Concentración de la Orina”. Los objetivos de la
práctica son: 1. Analizar la influencia que tiene el grado de hidratación del
individuo sobre el volumen y la osmolalidad de la orina; 2. Determinar la Tasa
de Filtración Glomerular usando la Depuración (“Clearance”) Plasmática de
Creatinina. 3. Analizar las características químicas de la orina normal. Se
realizan tres experimentos:
Experimento N°1: PRUEBA DE CONCENTRACIÓN Y DILUCIÓN DE LA ORINA
Este experimento ha sido diseñado para cumplir
con el objetivo 1. El mismo se realizará con las muestras de orina de los
estudiantes en régimen de Restricción Hídrica.
MATERIALES: Recipientes para recolectar la orina. Cilindros graduados. Tubos
de ensayo.
Pipetas. Pipetas Pasteur. Osmómetro.
La Osmolalidad es una
medida de la concentración molal de un soluto en su solvente y puede ser
expresada en miliosmoles por Kg de agua, si este es el solvente. Cuando un
soluto está disuelto en un solvente, cambian las propiedades coligativas[1]
de este, entre ellas el punto de congelación, esos cambios se basan en el
número de partículas en el solvente y no en sus características eléctricas,
peso o forma. Un Osmol de una sustancia disuelta en un kilogramo de agua
hace disminuir el punto de congelación
de la solución en 1,86 ºC. Así, en general:
Osmolalidad=∆Tc/Kc
con ∆Tc: Variación del
punto de congelación = Punto congelación del solvente puro-Punto congelación del
solvente en solución.
Kc: Constante crioscópica
o de congelación = 1,86°C/Osmol
En este experimento, para medir la Osmolalidad se usará un
osmómetro manual, el cual permite cuantificar la cantidad de partículas
solubles en una muestra, midiendo la disminución en el punto de congelación de
la solución, con una precisión de 2 miliosmoles.
La Osmolalidad puede calcularse también:
-Osmolalidad en plasma:
2([Na+]+ [K+]) + [Glucosa]/18 + [Urea] /5,6.
-Osmolalidad en orina:
([Na+U]+ [K+U]) + [Urea] /5,6.
(Na+U=Sodio urinario, K+ U=Potasio urinario).
Unidades: [Na+] y [K+] se expresan en mEq/L, [Glucosa] y
[Urea] en mg/dl. Los factores permiten obtener la Osmolalidad
directamente en miliosmol/L.
La osmolalidad urinaria se puede calcular de acuerdo a la densidad
como:
Osmolalidad urinaria= (densidad urinaria-1000 ) x 30.
Unidades: Para el cálculo la densidad urinaria se expresa en Kg/L.
El factor 30 permite obtener la osmolalidad en miliosmol/L.
El
trabajo práctico se realizará en dos etapas:
Recolección de las
muestras. Medida del volumen, densidad y
osmolalidad de cada muestra.
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Recolección de las muestras
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El trabajo práctico debe iniciarse con la
vejiga vacía, por eso se anotará la hora de la última micción antes de la
práctica, esa hora corresponderá al tiempo de inicio de la prueba
(tiempo t0). Las muestras de orina serán recolectadas al inicio de la
práctica (tiempo t1), veinte (20), cuarenta (40) y ochenta (80) minutos
después (a partir de t1). Son cuatro (4) muestras en total.
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Medida del Volumen y Osmolalidad de cada
muestra
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Una vez recolectada cada muestra de orina,
realice las mediciones correspondientes de volumen, densidad y Osmolalidad.
Cada una de las muestras será transferida a un cilindro graduado, claramente
identificado con el número de la muestra, para la medición del volumen. En
cada caso una alícuota de 5 ml se transferirá a un tubo de ensayo, claramente
identificado con el número de la muestra, para la medida de la Osmolalidad.
Ambas medidas se realizarán de acuerdo a las indicaciones del profesor de
práctica. La densidad de la orina se medirá usando un Densímetro o Urinómetro.
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Representación
de los Resultados obtenidos. Obtención de parámetros.
Para cada una de las muestras calcule:
El volumen minuto urinario (Ů = volumen
urinario/∆t)
∆t: tiempo entre micciones.
Volumen urinario: volumen de orina recolectado
al final de cada lapso.
El "Clearance" o depuración osmolar
(Closm) = Ů (Osm U/ Osm P).
El "Clearance" o depuración de agua
libre (ClH2O) = Ů –Closm
Reporte los valores y unidades
de sus resultados en la siguiente tabla:
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Muestra
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Intervalo Tiempo (min)
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Volumen (U)
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Volumen
Minuto
Urinario (Ů)
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Osmolalidad
P O
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Cl
osm
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Cl
H20
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Densidad
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| Lapso entre t0 y t1
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20 minutos
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20 minutos
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40 minutos
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NOTA: Esta tabla, con los resultados obtenidos, debe ser
entregada al profesor, en el salón, al concluir la práctica.
Indicando claramente la escala y las unidades, represente
gráficamente:
Volumen con respecto al
tiempo. Volumen minuto urinario respecto al tiempo. Osmolalidad con respecto al
tiempo.
Depuración de H20 libre con respecto
al tiempo
RESPONDA EN SU INFORME:
1. ¿Existen diferencias
entre el volumen urinario y el volumen minuto urinario? 2. Establezca las diferencias obtenidas en cuanto a estos parámetros
en cada una de las muestras y relaciónelas con el estado hídrico del individuo
(deshidratado, en balance hídrico o sobrehidratado). 3. ¿Exclusivamente, con un valor negativo, positivo o nulo de la
depuración de agua libre puede deducirse el estado hídrico del sujeto?
Experimento 2: depuraciÓn
plasmÁtica de creatinina
Este experimento ha sido diseñado para determinar la tasa de
filtración glomerular usando el "clearance" o depuración plasmática
de creatinina, y se realizará con las muestras de orina de 24 horas de los
estudiantes preparados para la prueba de depuración. El estudiante debe estar
en ayunas de 10 horas y sin haber realizado ejercicio intenso o moderado antes
de iniciar la práctica.
Materiales (por equipo
de estudiantes)
Recipientes, cilindros graduados. Los estudiantes deben recolectar
la orina en envases plásticos para las pruebas de depuración.
Fundamento del mÉtodo
El método se basa en que
la creatinina y otros compuestos reaccionan con ácido pícrico en un medio
alcalino, formando un complejo rojo, cuya intensidad es proporcional a la
concentración de creatinina en la muestra, y puede determinarse por
fotocolorimetría. El uso del reactivo alcalino minimiza el efecto de las otras
sustancias presentes en la orina. Los reactivos utilizados para la
determinación de creatinina son: Estándar de creatinina 10 mg/dl y un reactivo
formado por una solución saturada de Ácido Pícrico y el reactivo alcalino de
NaOH.
El trabajo práctico se realizará de la siguiente manera:
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Procesamiento de la muestra
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Mida el volumen (de 24
horas) y la osmolalidad de la orina, siguiendo el protocolo del Experimento
1.
Pese y mida al
estudiante que suministró la muestra de orina para esta prueba y anote los
valores obtenidos.
Las determinaciones en
sangre y orina se realizarán en un laboratorio clínico. Para la determinación
en orina cada equipo preparará en el salón de práctica, una dilución 1/10 de
la muestra, la cual será enviada al laboratorio posteriormente.
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Representación de los
Resultados obtenidos. Complete la siguiente tabla indicando las unidades
de los datos encontrados.
TABLA DE RESULTADOS
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Volumen de orina recolectado en 24 horas
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Talla del
individuo
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Peso corporal
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Volumen minuto calculado
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Esta tabla, con los
resultados obtenidos, debe ser entregada al profesor, en el salón, al concluir
la práctica.
Calcule el valor de depuración de creatinina.
Utilizando la siguiente expresión (Método
de Jaffé):
Depuración de Creatinina = [Creatinina
en orina] x Volumen minuto urinario
x 1,73/SC.
[Creatinina en plasma]
Corregir el valor obtenido de depuración de
creatinina con la superficie corporal total, multiplicando por 1.73/SC (factor de superficie corporal),
donde 1.73 es un promedio de superficie corporal en metros cuadrados y SC es la
superficie corporal del estudiante, la cual se obtiene en el nomograma de
DUBOIS (ubicado al final de la práctica), a partir de la talla y el peso del
estudiante que realizó la prueba. Multiplicar
por 0.85 en caso de sexo femenino.
La creatinina en orina y en plasma se expresan generalmente en
mg/dl.
El volumen minuto urinario en ml/min.
La depuración de creatinina en ml/min.
Realice también el cálculo de la depuración de
creatinina con la fórmula matemática de
Cockcroft y Gault3:
Depuración de Creatinina= (140-Edad) x Peso
72 x
Creatinina sérica
(Multiplicar por 0.85 en caso de sexo femenino). En esta fórmula
no se multiplica por el factor de superficie corporal porque ya está
intrínsecamente incorporado en la fórmula. La edad debe estar en años y el peso
en Kg.
RESPONDA EN SU INFORME:
1. ¿Los resultados obtenidos están en el rango
normal? 2. ¿Qué relación hay entre la depuración plasmática de creatinina y la
tasa de filtración glomerular? 3. Explique
por qué los valores obtenidos de depuración de creatinina, utilizando las dos
fórmulas son en general diferentes.
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