Abril-Junio 2006 27
ISSN 1317-987X
 
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Microbiología
Variabilidad en los exoproductos de Pseudomonas aeruginosa aislada de diferentes muestras clínicas

Discusión

Las Pseudomonas aeruginosa pueden excretar una variedad de factores, muchos de los cuales han sido asociados con su virulencia, esta característica aunada a los patrones de resistencia a los antimicrobianos que posee, inciden directamente en la evolución de la enfermedad ocasionada por esta bacteria.

En el presente trabajo se demuestra a través de electroforesis en gel de poliacrilamida, que las cepas analizadas elaboran y liberan factores proteicos diferentes, tanto en el número de bandas como en sus pesos moleculares. La cepa aislada de aspirado bronquial produjo el mayor número de bandas, mientras que la cepa aislada del líquido peritoneal produjo el menor número de ellas (Fig. 1). Existen reportes que indican que en las muestras del tracto respiratorio bajo se identifican la exoenzima S, la exotoxina A y proteasas en proporciones de 85, 79 y 65%, respectivamente (43), en nuestro caso y a juzgar por los PM de éstas enzimas (entre 66.000 y 71.500 D para la exotoxina A y 105.000 D para la exoenzima S) no se evidenciaron bandas con estos pesos moleculares ya que la mayoría se ubicaron entre 12.000 y 54.000 D.

El único exoproducto con una banda proteica de peso molecular similar a la de la exoenzima S (105.000 D) fue el producido por la cepa aislada de orina (Fig.1.1). Aunque hace dos décadas la exoenzima S no era muy común en los aislados clínicos (46, 47), pero en la última decada se ha identificado con alta frecuencia en cepas aisladas de orina (Hamood y col, 1996 (43), Rumbaugh y col., 1999 (44) y Rumbaugh y col., 1999 (45), su mayor prevalencia en la actualidad podria estar relacionada a la frecuencia de P. aeruginosa como agente infeccioso de diversos cuadros clínicos, incluyendo las del tracto urinario sobre todo en pacientes hospitalizados.

Si bien no evidenciamos la exotoxina A en los exopoductos de la cepa aislada de aspirado traqueal, si parece estar presente en las cepas aisladas de la herida de absceso en cuello y de una úlcera leishmánica (Fig.1. columna 4 y 5). Tomando en consideración que la exotoxina A se aísla con mayor frecuencia en muestras de heridas (43), se esperaría encontrarla también en las cepas aisladas de herida de colón y de la úlcera leishmánica 35 días más tarde después del aislado inicial. Sin embargo, su ausencia (Fig.1 columna 3 y 6) podría interpretarse por la variación fenotípica que pudiera ocurrir en la bacteria en una infección crónica, debido a la presión inmunológica inducida por el hospedador y/o por la presión de los tratamientos antimicrobianos suministrados al paciente (49).

Es notorio que en casi todos los aislados (Fig. 1. Columna 1, 2, 3, 5 y 6) aparecen bandas que por sus pesos moleculares de 49.000, 50.000 y 52.000 D pudieran ser proteasas, ya que en esta bacteria se han reportado varias proteasas con pesos moleculares dentro del rango 48.000 y 54.000 D (50, 51). Aunque las proteasas son factores comunes en la mayoría de los aislados de Pseudomonas aeruginosa en este trabajo no se pudo evidenciar en los aislados de la herida quirúrgica en cuello (Fig. 1 columna 4) ni en el de líquido peritoneal (Fig. 1 columna 7).

Existe una gran variedad de proteínas de pesos moleculares menores a los descritos anteriormente, algunos de ellos se encuentran entre 34.000 y 38.000 D, los cuales están presentes en todos los aislados y podrían interpretarse como adhesinas, cuyo papel es en la adherencia no mediada por Pili de Pseudomonas aeruginosa a la matriz celular (52) y esta función explicaría su presencia en la mayoría de los aislados de las muestras clínicas. Otras, que se encuentran en el rango de 12, 13, 21.000 están en los exoproductos de la cepa aisladas de aspirado bronquial, orina y absceso en cuello.

Es notoria en los exoproductos de las cepas 2, 3 y 4 la presencia de una proteína de 7.000 D, la cual por su peso molecular podría tratarse de flagelinas (53).

Estos resultados demuestran que las cepas de Pseudomonas aeruginosa aisladas de diferentes cuadros clínicos presentan variabilidad fenotípica manifestada en sus productos extracelulares. Esta variabilidad parece depender del cuadro clínico del paciente y por ende de la muestra clínica de donde fueron aisladas. En consideración de esto, si tal variabilidad ocurriese en la infección in vivo, el conflicto entre el hospedador y la bacteria disminuiría, ya que se eliminarían los efectos patógenos del (los) factor (es) no excretados al medio circundante. Por ejemplo, se ha demostrado que aquellos pacientes infectados con cepas no productoras de exotoxina A tienen mejor pronóstico en la enfermedad (24, 54, 55).

En conclusión estos resultados demuestran que las cepas de diferentes tejidos en los diversos cuadros clínicos en humanos presentan variabilidad fenotípica in vitro. Esta variación no parece ser codificada geneticamente (44, 45) ni tampoco depende del medio de cultivo, ya que todas las cepas se cultivaron en las mismas condiciones.

De acuerdo con esto, Woods y col, 1986 (56), encontraron variabilidad en los productos excretados por Pseudomonas aeruginosa pero en la concentración de las enzimas dependiente de la muestra clínica aisladas de los pacientes estudiados.

Resalta el número de bandas proteicas evidenciadas en los exoproductos de aspirado bronquial, orina y herida quirúrgica no están descritas por otros investigadores, cuyo papel patógeno habría que definir dada la importancia de esta bacteria como agente infeccioso.
 
Agradecimientos: Los autores agradecen su colaboración a la Unidad de Microbiología y Enfermedades Infecciosas del Hospital Vargas de Caracas, Venezuela.
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Materiales y Métodos
Resultados
Discusión
Referencias Bibliográficas

NOTA: Toda la información que se brinda en este artículo es de carácter investigativo y con fines académicos y de actualización para estudiantes y profesionales de la salud. En ningún caso es de carácter general ni sustituye el asesoramiento de un médico. Ante cualquier duda que pueda tener sobre su estado de salud, consulte con su médico o especialista.





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