Farmacología
Comparación del efecto del nitroprusiato de sodio e inhibidores de la fosfodiesterasa 5 en anillos de las arterias pulmonar principal y aorta de la rata.
Materiales y métodos
Se utilizaron ratas Sprague-Dawley provenientes del
bioterio del Instituto de Medicina Experimental, Universidad Central de
Venezuela (Caracas), con un peso de 350 ± 35 g, mantenidos con comida
(Ratarina®) y agua a voluntad. Se inyectaron intraperitonealmente con tiopental
sódico (50 mg/Kg de peso) y mediante toracotomía media se extrajo ad bloc el
corazón y la arteria pulmonar principal y luego se identificó y cortó pequeños
anillos de la arteria pulmonar principal. Estos fueron colocados en una
solución de Krebs-Henseleit con la siguiente composición (en mM/litro): NaCl,
119; KCl, 4,7; MgSO4 1,5; KH2PO4, 1,2; NaHCO3
, 25; CaCl2 , 2,5; MgSO4 , 1,2 y glucosa, 11, burbujeada
constantemente con 95% O2 , 5% CO2 a 37° C, pH= 7,4.
Estos anillos se montaron en dos estribos de acero inoxidable y se llevaron a
un baño para órgano aislado (15 mL) conectado a un transductor de
fuerza-desplazamiento FTO3, (Grass Instruments C.O. Quince, Mass. USA) y este,
a su vez, a un preamplificador Grass, modelo 7C, con una tensión inicial de dos
gramos. Se estabilizó durante 2 horas y se indujo una primera contracción con
una solución de KCl= 40 mM para asegurar la viabilidad de la preparación. Se
registró la respuesta en un polígrafo Grass, Modelo 7C a una velocidad de 2,5
mm/min. Para determinar si el endotelio estaba intacto funcionalmente, se
añadió acetilcolina a una concentración de 1 x 10-6 M a la arteria
pulmonar principal contraída, según el método de Furchgott y Zawadzki (18).
Los experimentos fueron expresados como la media ± el error estándar (X±EEM).
La significación estadística fue determinada por la prueba no pareada de t de
Students para dos grupos de comparación. Una regresión no lineal simple se
realizó en cada curva de dosis-respuesta (Graphpad Software Inc. Versión 6,01).
Las curvas de dosis-respuesta al nitroprusiato de sodio se realizaron en un
rango de concentraciones de 1 x 10-9 M, hasta 1 x 10-5
M y las del tadalafil, vardenafil y sildenafil, se realizaron entre de 1 x 10-7 M, hasta 1 x 10-4 M. En
otra serie de experimentos se estimuló con KCl= 40 mM; y luego de alcanzarse la
contracción máxima se realizó una curva de dosis respuesta al sildenafil, (1 x 10-9 a 1 x 10-4 M) y con nitroprusiato de sodio 1 x 10-10
M, hasta 1 x 10-6 M. En otros experimentos se estimuló con
norepinefrina (1 x 10-6 M), donde al alcanzarse la respuesta máxima
se añadieron concentraciones crecientes de sildenafil, tadalafil, vardenafil (1
x 10-9 a 1 x 10-6 M) y de nitroprusiato de sodio, 1 x 10-7 M,
hasta 1 x 10-4 M.
Se realizaron curvas de dosis respuesta a la NE (1 x 10-10
hasta 1 x 10-5 M) en ausencia y en presencia de nitroprusiato de
sodio (1 x 10-8 M) y sildenafil (5 x 10-4 M) y de NTPNa
en ausencia y en presencia de azul de metileno (MB) (1 . 10-5 M). Se
administró 24 horas antes del sacrificio
del animal una dosis de reserpina de 2 mg/Kg de peso, vía intraperitoneal |