Julio-Septiembre 2018 75
ISSN 1317-987X
 
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Fisiopatología
Efecto de la Carbamilcolina y el veneno de escorpión Tityus zulianus en la secreción de proteínas de los acinos pancreáticos aislados de ratón NIH

Discusión

La viabilidad celular en la suspensión de acinos pancreáticos aislados fue superior al 90% y sólo se observó una disminución significativa cuando se combinaron las concentraciones más elevadas de Cch y TzV (30μM y 128,5 μg/ml, respectivamente). Es posible que esta combinación descrita ejerza un efecto tóxico a las concentraciones descritas, debido a que se produce una mayor liberación de enzimas proteolíticas por Cch. Éste tiene un efecto inductor que al adicionarse junto al TzV produce un efecto potenciador en cuanto a la liberación de proteínas. Por consiguiente, las enzimas así liberadas pueden generar autodigestión de proteínas estructurales, la liberación de enzimas lisosomales, lo cual puede conducir a fenómenos apoptóticos, y daños por procesos inflamatorios (14,15). El efecto pancreatotóxico inducido por el veneno de escorpión ha sido descrito anteriormente en lóbulos pancreáticos (16) y en estudios de histopatologías (17).

Adicionalmente, los mecanismos propuestos se soportan con los ensayos que evalúan la secreción de proteínas del acino pancreático al medio extracelular, como se describe en la figura 3. La secreción de proteínas inducida por la Cch sigue una tendencia exponencial característica de una curva dosis respuesta, a diferencia del TzV que parece inducir una liberación significativa de proteínas sólo a 128,5 μg/mL y se mantienen estables a concentraciones menores. Este efecto de la Cch sobre la secreción de proteínas en acinos pancreáticos ha sido descrita por varios autores (18, 19, 20, 21, 22) y ésta se explica debido a la respuesta que ejerce la acetilcolina sobre los receptores muscarínicos (M1 y M3) los cuales promueven los mecanismos de liberación asociados al incremento intracelular de calcio inducidos por la activación de proteínas G y la generación de segundos mensajeros (23, 24, 25, 26, 27).

Por otra parte, las toxinas α y β presentes en TzV (28) aumentan la conductancia de los canales de sodio, los cuales pueden asociarse a los canales de calcio, que en tejido no excitable incrementan la concentración intracelular de este ion y en consecuencia tiene lugar la migración de las vesículas con alto contenido proteico, su fusión con la membrana celular y la posterior liberación de las proteínas al medio extracelular. Resultados similares han sido obtenidos en investigaciones que estudiaron la caracterización de receptores implicados en la secreción de proteínas de los acinos pancreáticos aislados con el uso de Cch (22).

El marcador más frecuente utilizado para medir daño pancreático es el aumento en la actividad de amilasa sérica (29,30). Bajo esta premisa se evaluaron los efectos de la Cch, el TzV y la combinación de ambos sobre este parámetro. Al evaluar la curva dosis respuesta los resultados para Cch fueron similares a los obtenidos en la secreción de proteínas secretadas al medio extracelular, o sea siguen una tendencia exponencial con un LogCE50= 0,56μg/ml y Emax= 7,74 U/mg de proteínas. Estos resultados son comparables a los obtenidos por Williams y Gautam (22,31) quienes describen una actividad máxima de alrededor de 7 U/mg de proteínas cuando se administró Cch 10-6 M, en un modelo similar al de este estudio. El TzV produce un patrón de secreción de amilasa similar al obtenido con la Cch y una CE50=0,54 μg/ml y Emax=6,94 U/mg de proteína. Esto sugiere que la secreción de esta enzima sí responde a un patrón de efecto dosis respuesta. No se encontró en la base de datos estudiada algún resultado que pudiera compararse con el obtenido en este estudio. Por otra parte, el efecto del veneno de escorpión sobre la secreción pancreática ha sido evaluado en otros modelos. En este sentido, Novaes en un estudio donde recolectó jugo pancreático por canulación del conducto en ratas, demostró un aumento en la actividad de amilasa inducida por efecto del veneno de Tityus serrulatus (21).

Con respecto a la actividad específica acumulada de tripsina se observó que la determinación de ésta en el medio extracelular de la suspensión de los acinos es independiente de la concentración de TzV administrada. No se encontró en la literatura consultada resultados que permitieran realizar una comparación del efecto del veneno de escorpión sobre la actividad de esta enzima. Este es uno de los motivos por lo cual la determinación de tripsina liberada se hace importante, además, tanto los estudios in vivo como in vitro la involucran en el desarrollo de pancreatitis porque ejerce un efecto activador sobre la liberación citosólica de catepsina B y el consiguiente desarrollo del proceso inflamatorio (32). Adicionalmente, la liberación inicial de tripsina de unas pocas células acinares puede estar asociada a mecanismos que involucran el aumento intracelular de calcio y la consecuente activación de células estrelladas pancreáticas que inducen, a su vez, la liberación y activación de enzimas pancreáticas que incluyen a la tripsina.

En conclusión, estas evidencias conllevan a sugerir que el veneno de Tz conduce al desarrollo de mecanismos que incluyen fenómenos proteolíticos asociados a una hiperestimulación del receptor colinérgico por una excesiva liberación de Ach, la cual conduce a un aumento en la liberación y activación in situ de las enzimas pancreáticas (33, 34, 35), las cuales pueden pasar a circulación sistémica y servir como marcadores diagnósticos (amilasa y lipasa). Paralelamente podría tener lugar un proceso de autodigestión producto de la liberación de enzimas proteolíticas desde los ácinos. Si esta liberación se hace progresiva se activarían otros mediadores proinflamatorios que al pasar a la circulación sistémica podrían inducir cuadros cardiorrespiratorios ya demostrados en modelos in vivo y finalmente un síndrome de falla de múltiple órganos ya descritos en la evolución de la pancreatitis (4,15).

Agradecimientos por apoyo técnico a: Eglys Chirinos.
Agradecimientos por suministros de materiales y equipos: Dr. Manuel Moya y Dra. Fátima Torrico.



Continua: Referencias

Efecto de la Carbamilcolina y el veneno de escorpión Tityus zulianus en la secreción de proteínas de los acinos pancreáticos aislados de ratón NIH
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Métodos
Resultados
Discusión
Referencias

NOTA: Toda la información que se brinda en este artículo es de carácter investigativo y con fines académicos y de actualización para estudiantes y profesionales de la salud. En ningún caso es de carácter general ni sustituye el asesoramiento de un médico. Ante cualquier duda que pueda tener sobre su estado de salud, consulte con su médico o especialista.





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