Parasitología
Ultraestructura de Blastocystis hominis y su enquistamiento en cultivo polixénico.
Materiales y métodos
El
aislado Bh69:UCV de B. hominis, proveniente de un paciente con
sintomatología intestinal, fue obtenido en el Laboratorio de Amibiasis a partir
del aislado original y mantenido en cultivo
polixénico con la flora intestinal asociada, en el medio de Boeck-Drbohlav modificado (BDM), el cual es un medio
bifásico, con una fase sólida constituida por huevo y sangre humana desfibrinada,
que se esteriliza mediante tindalización a 80ºC, una fase líquida constituida por un
Ringer, al momento de la siembra se agrega almidón de arroz estéril y se incuba a 37ºC (Pérez de Suárez,
E.1986, Pérez de Suárez y Guzmán de Rondón, 1994). El cultivo fue examinado a las 24, 48 y 72 horas mediante
examen microscópico del sedimento entre lámina y laminilla y el mantenimiento
del aislado fue por resiembras sucesivas a un medio de cultivo fresco. Para la
observación se utilizó microscopio Olympus calibrado, con ocular micrométrico para
medición e identificación parasitológica, y con cámara digital adaptada para el
registro fotográfico. Los sedimentos de cultivos con diferentes tiempos de
incubación, desde 24 hasta 72 horas fueron fijados en
Karnosky y este material fue procesado según las técnicas convencionales de
microscopía electrónica de transmisión (MET) para su posterior estudio
ultraestructural. Se lavó con buffer fosfato y postfijó con tetróxido de Osmio.
Las células fijadas fueron deshidratadas en una serie ascendente de acetona y
luego incluídas en Araldita. Los cortes fueron contrastados con acetato de
Uranilo y observados en microscopio electrónico Hitachi modelo H-300, del
Laboratorio de Biología Celular del Instituto de Medicina Tropical, de la Universidad Central
de Venezuela.
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