En los últimos años los complejos de oro en sus estados de oxidación +1 y +3 (Au(I) y Au(III)) han sido estudiados como potenciales agentes antitumorales, generalmente en sistemas de células cultivadas en los cuales han mostrado una elevada citotoxicidad (11). Por otra parte, se ha determinado que en ciertas patologías como el cáncer y la artritis están asociadas con situaciones de estrés oxidativo que traen como consecuencia la producción de eventos celulares tales como la necrosis, apoptosis e inhibición de la proliferación (12). Además, existen algunas evidencias in vitro que sugieren que los complejos de oro pueden generar situaciones de estrés oxidativo (13). Sin embargo, existen defensas antioxidantes como lo es el glutatión cuya actividad sugiere que especies reactivas de oxigeno probablemente jueguen un papel relevante en el mecanismo subyacente de la muerte celular inducida por los complejos de oro (14)

Se evidenció que la co-incubación de las células U937 con 10 mM de GSH revierte parcialmente la necrosis producida a las 24 y 48 horas de incubación sólo para una concentración de 1 µM de BmAu (Figura 3A y 3B), aunque para 5µM también se produjo una disminución notable de la necrosis, pero el efecto a esta concentración de 5 µM fue estadísticamente significativo con respecto al control. En este sentido, debe destacarse que los efectos citotóxicos en células Jurkat de algunos complejos de oro como la auranofina y clotrimazol-oro fueron parcialmente revertidos por otro antioxidante como lo es la catalasa, de un modo dosis-dependiente para esa enzima(15).así mismo otros estudios señalan que el mecanismo de acción, de algunos complejos de oro como el ([AuL1(PPh3)]TfO) posiblemente, actúa elevando los niveles de ROS debido a su capacidad de inhibir la enzima Tiorredoxina Reductasa (TrxR), además de actuar sobre la subunidad β5 del proteasoma, provocando su inhibición(16). Es importante señalar que en ese trabajo emplearon un rango de concentración de 0,1-10 µM de los complejos de oro siendo la concentración de 1 µM auranofina y de 1- 5 µM clotrimazol-oro las que lograron revertir el efecto citotóxico. Por lo tanto, los resultados obtenidos con BmAu concuerdan con la publicación antes señalada.

Al realizar la evaluación de la apoptosis el GSH solo logró revertir el efecto apoptótico para una concentración de 1 µM de BmAu a las 24 horas de incubación (Figura 5A) mientras que para 5 µM no se logró revertir este efecto. Además, a las 48 horas de incubación se mantuvo tanto para 1 y 5 µM de BmAu (Figura 5B) el efecto proapoptótico, e inclusive para la mayor concentración de BmAu se originó un incremento de la apoptosis lo cual refleja que el efecto antioxidante del GSH es dependiente de la dosis del complejo y del tiempo de incubación. Sugiriendo que la inducción de apoptosis por BmAu se debe, al menos en parte, a la generación de estrés oxidativo.

La presencia de 10 mM GSH revierte la inhibición de la proliferación producida por BmAu a 1 µM tanto a las 24 horas como a las 48 horas de incubación mientras que a 5 uM dicho efecto no fue revertido (Figura 7), lo que demuestra nuevamente que el efecto protector del GSH respecto al efecto antiproliferativo producido por BmAu es dependiente de la concentración. Es importante señalar que tanto para la inducción de apoptosis como la inhibición de la proliferación celular el efecto protector del GSH se produce cuando se incubaron las células con 1 µM de BmAu, correspondiendo este resultado con la concentración reportada para auranofina, la cual no logró afectar el contenido de GSH en células Jurkat (17); sin embargo, el tiempo de incubación fue de 2 horas en contraste con las 24 y 48 horas del presente trabajo. No obstante, los resultados presentados aquí demuestran que los efectos antiproliferativos y apoptóticos de BmAu no pueden ser revertidos por el GSH en todo el rango de concentración (1- 5 µM) lo que sugiere que posiblemente la generación del estrés oxidativo por BmAu es limitado.

La capacidad mostrada por BmAu de posiblemente inducir, aunque moderadamente, la producción de especies reactivas de oxigeno en células U937, así como la mostrada por otros complejos de oro en células Jurkat, puede tener implicaciones terapéuticas no suficientemente exploradas. Aún por ejemplo, se ha demostrado que Auranofina puede reprimir las actividades transcripcionales sensibles al status redox intracelular, tales como las de AP-1 (Activating Protein-1) y las de NF-κB (Nuclear Factor-kappa B) así como activar al factor de transcripción Nrf2 (Nuclear erythroid 2 p45-related factor 2). Este último está involucrado en la estimulación de la expresión de diversos genes anti-oxidantes incluyendo el de la enzima gamma-glutamil-cisteinil sintetasa (γ-GCS), cuya actividad limita la velocidad de síntesis del GSH (18). Estas notables propiedades de los complejos de oro podrían ameritar que sean incluidos dentro del arsenal de nuevos fármacos que funcionen como agentes preventivos o curativos de algunos tipos de cáncer.

CONCLUSIONES