En este caso CRISPR/Cas9 es dirigido al
locus genómico de NLRP3, para inhibir su activación dentro de los
queratinocitos y células inmunitarias, Mediante la detección de diferentes
secuencias de ARN de guía única (sgARN) en el locus en células DC2.4, se logra
la eliminación, inserción y sustitución de bases en el PAM en la secuencia
objetivo. (16)
La entrega de dexametasona en forma de
nanopartículas (dosis: 0,1-0,4 gr/ml) produce dilatación de los poros nucleares
durante su proceso de translocación, contribuyendo a la entrada nuclear de
agentes de edición de genoma. (16)
Para confirmar la eficacia del parche en la
interrupción del proteasoma NLRP3 mediada por CRIPS/Cas9 se detectó la
expresión de las citocinas producto de su activación, los cuales se bajo-regularon
en comparación con aquellos modelos no tratados con el parche. De igual forma,
se observó reducción de las concentraciones IgE e IL-4, indicadores importantes
de dermatitis atópica. (16)
Con esta técnica no sólo se disminuye la
respuesta inflamatoria, sino que mejora la sensibilidad a glucocorticoides.
(16)
En el caso del modelo de dermatitis atópica
se observó mejoría de edema, escoriación, erosión y prurito (principal síntoma
de actividad de la enfermedad), así como crecimiento del pelo en espalda. No
hubo evidencia de toxicidad sistémica. Hubo reducción de la pérdida
transepidérmica de agua mejorando hidratación de la piel, efecto no alcanzado
con cremas de dexametasona o tracrólimus. Se demostró histológicamente
reducción de infiltración de mastocitos dérmicos.(16)
En el modelo de psoriasis se confirmó la
inhibición de NLRP3 a través de la expresión de IL-1, pro-IL1, IL-18 y NLRP3 en
piel, los cuales se redujeron significativamente, así como las citocinas claves
relacionadas con la psoriasis (TNF-α, IL-17, IL-12, IL-23). Se observó una
reducción en puntaje de score de PASI. (16)
El análisis
histológico reveló disminución de la hiperplasia epidérmica e infiltrado de
células inflamatorias en comparación con los ratones tratados con monoterapia
(dexametasona, tacrólimus, parche en blanco o solo con dexametasona). (16)
Por lo antes mencionado, la administración
combinada de CRISPR/Cas9 RNP y dexametasona en forma de parche con micro agujas
podría ser una estrategia prometedora para tratar inflamación en dermatitis
atópica y psoriasis. (16)
b. Infecciones bacterianas:
Ante la creciente resistencia
antimicrobiana los investigadores han apuntado a diseñar estrategias que
modifiquen al genoma bacteriano para inactivar el patógeno y prevenir la
replicación e infección.
Lam y colaboradores, en el año 2021,
emplearon un bacteriófago, capaz de infectar E. coli y enterobacterias así como
de empaquetar y entregar sistemas CRISPR/Cas dirigidos a un gen específico
denominado sfgfp, lo cual provocó un crecimiento de colonias deteriorados e
indujo delecciones cromosómicas en el gen objetivo. (17)
Selle y colaboradores en el 2020, evaluaron
la actividad antimicrobiana contra Clostridium difficile de CRIPR/Cas3
utilizando fagos in vitro e in vivo, reduciendo las alteraciones de la
microbiota intestinal que contribuyen con las recaídas. Observaron una mayor
reducción y poca recuperabilidad del cultivo tras 24 horas y una carga fecal de
C. difficile significativamente reducida. Siendo un enfoque prometedor de
terapias CRISPR como antimicrobiano, así como modulador del microbioma. (18)
Estos estudios marcan precedentes para
considerar en un futuro el uso de estas terapias en el manejo de infecciones de
piel por S. aureus MRSA, foliculitis por P. aeruginosa e incluso acné en casos
de alergias o refractariedad a antibióticos. (5)
