Bioanálisis
Síntesis y estimación del tamaño por espectroscopía UV/Visible de nanopartículas de plata (NPsAg) empleando quercetina como agente reductor
Materiales y métodos
Preparación de la soluciones de
quercetina (QCT)
Se
emplearon 4 soluciones de quercetina a concentraciones de 2, 4, 8 16 µg
/mL, preparadas a partir de una
solución madre a una concentración de 32 µg/mL, preparada pesando en una
balanza analítica 3,2 x 10-2 mg
de QCT y diluyendo con 1 mL de dimetilsulfóxido (DMSO) en un micro-vial de 1,5
mL. Estas se mantuvieron bajo sombra a 25 0C.
Preparación de la solución de nitrato
de plata (AgNO3)
Se
empleó una solución 3,5 mM de AgNO3,
la cual fue preparada disolviendo 6 mg de la sal en 10 ml de agua bidestilada.
Optimización y síntesis de las
nanopartículas de plata (NPsAg)
Para la síntesis de las NPsAg se mezclaron
en una beaker, 10 ml de cada una de las
soluciones de quercetina con 10 ml de la
solución de AgNO3. Empleado una plancha de calentamiento se procedió a calentar
por 15 min la solución a una temperatura de 90 0C, estabilizando el
pH de la solución a 6,8 con hidróxido de
sodio (NaOH) 0,1 M. Posteriormente se transfirió a tubos de ensayos
polipropileno para de 50ml y centrifugado a 5rpm por 8 minutos, retirando luego
el sobrenadante y obteniendo así las
NPsAg en el fondo del tubo (Pacheco, 2021).
Análisis
espectrofotométrico por UV-VIS de las
NPsAg
La formación de nanopartículas se analizó
mediante espectrofotometría UV-Vis (Thermo Scientific™ GENESYS™ 20, USA). Se
realizó un barrido espectral de cada síntesis, en un rango de longitudes de
onda de 410 a 450 nm, estimando el tamaño de las nanopartículas de (2 a 40 nm).
Para el análisis de las nanopartículas, se re suspendieron con agua bidestilada
hasta un volumen final de 4 mL. Se colocó 1 mL de la dilución anterior en una
celda con 1 cm de recorrido óptico y se realizó el barrido espectral (Kannan,
et al., 2013; Rodríguez-León, et al., 2013).
Análisis
estadístico
Los ensayos se realizaron por triplicados
expresando los valores obtenidos como media ± desviación estándar empleando el
programa estadístico Statixtic 9.0 para Windows. |