Los 40 casos estudiados en este trabajo fueron recibidos para su estudio histológico e inmunohistoquímico en el Laboratorio de Patología Molecular NOVAPATH, en Caracas, Venezuela, entre junio y diciembre del año 2003 y de enero a abril del año 2004.

El material se recibió ya incluido en parafina. Se hicieron cortes de dos a tres micras y se procesaron por métodos de rutina y finalmente se tiñeron con hematoxilina y eosina, y se examinaron con un microscopio de luz.

Después de la evaluación diagnóstica y cotejados los datos clínicos, se decidió en cada caso hacer el estudio inmunohistoquímico utilizando TTF-1 y otros anticuerpos de acuerdo con el diagnóstico diferencial planteado. En algunos casos, antes del estudio inmunohistoquímico, se realizó la coloración de PAS con el reactivo de Schiff usando la digestión con diastasa para la detección del glicógeno. Los cortes de dos a tres micras, fueron hechos en un micrótomo rotatorio y recogidos en láminas sialinizadas o recubiertas con Poli-L-lisina, previo bloqueo de la peroxidasa endógena con peróxido de hidrógeno-metanol. Se utilizó para la recuperación antigénica una solución de citrato de sodio a pH 6, en una olla de presión dentro de un horno de microondas para elevar la temperatura a 100°C durante varios minutos. Se usó como cámara húmeda un sistema de capilaridad de la casa Shandon y el revelado se hizo con el sistema de LSAB+System HRP de DAKO.

El anticuerpo monoclonal contra TTF-1 fue de DAKO y se utilizó en una dilución de 1:40. Otros anticuerpos usados también fueron de DAKO a las diluciones correspondientes: Queratina 7, Queratina 20, EMA, CEA, Queratina AE1-AE3, Queratina 34Beta E12, Calretinina, Receptores de Estrógenos y de Progesterona, Antígeno Prostático Específico, Enolasa Neuronal Específica, Sinaptofisina, Vimentina, Proteína S100, Tiroglobulina y HEP.