Se realizó un estudio
experimental, prospectivo, comparativo, para valorar las fases de cicatrización
temprana en anastomosis de intestino delgado de cerdos
a quienes se les produjo un aumento de la presión intraluminal con
solución salina al 0,9%. El presente estudio se llevó a cabo en la unidad de
Investigación Quirúrgica de la
Escuela de Medicina José María Vargas de la Facultad de Medicina de la Universidad Central
de Venezuela, con autorización del Comité de í‰tica de la Escuela de Medicina José
María Vargas para la realización de los
procedimientos quirúrgicos.
Protocolo:
Se utilizaron cerdos de la raza Large White, lechones de 20 kilogramos de peso
(machos y hembras) tres de ellos para la determinación
del Volumen Intraluminar de dehiscencia (VID)
y del Volumen Intraluminar de Tolerancia (VIT).
Estos tres cerdos son sacrificados al finalizar la determinación de los
volúmenes. Cuatro cerdos para el
grupo control y 17 cerdos para el grupo experimental. Con un total de 21 cerdos
en el grupo estudio.
Determinación del volumen intraluminar de dehiscencia VID y del volumen
intraluminar de tolerancia VIT: A cada uno de los tres cerdos se les realizó laparotomía
media exploradora, con identificación de un segmento de asa ileal (Figura
1), a dicho segmento se le practica resección de cinco centímetros y
seguidamente anastomosis termino-terminal en un solo plano con material
absorbible Poliglactin 910 (Vicryl ®) 4-0 , se colocan clamps de coprostasis
tanto distal como proximal a la anastomosis, a una distancia de cinco centímetros de ella , a través de una inyectadora de 10 ml con
aguja número 21 se administra por punción solución salina al 0,9%, se mantiene la colocación de
los clapms por un período de 10 minutos y posteriormente son retirados. En
primera instancia se calcula el volumen intraluminar de dehiscencia que fue de
40 ml de solución 0,9%,(comienzo de filtración de la solución a través de la
anastomosis) posteriormente se realiza, en otro segmento ileal una nueva
resección y anastomosis con la misma técnica, en esta anastomosis calcularemos
el volumen intraluminar de tolerancia a través de nueva punción con aguja 21,
(distensión máxima sin llegar a filtrar a través de la anastomosis) el volumen
determinado fue de 30 ml de solución salina al 0,9%
VIT
VID= 40 ml VIT= 30 ml.
Figura 1. A: Identificación de un Segmento de asa Ileal. B: Administración de solución
fisiológica 0,9% a través de punción con aguja No 21 para determinación del VID. C: Administración de solución fisiológica 0,9%
a través de punción con aguja No 21 para determinación del VIT.
Grupo control de 4 cerdos. Todos los grupos fueron
premedicados vía intramuscular con: Ketamina 40 mg x Kg. Xilacina 4 mg x Kg. y Atropina 0,5 mg x 10
Kg. Durante el acto
quirúrgico se utilizó una máquina Ohio con
vaporización de enflurano Ethrane ®. Anestesia
general inhalatoria vía mascara y oxigeno 4 litros, fentanyl 0,5 cc
vía intramuscular y se
les realizó laparotomía exploradora según las técnicas standard, y siguiendo
las normas de asepsia y antisepsia correspondientes a la Unidad de
Investigación Quirúrgica. Al grupo control se le practicó resección y
anastomosis intestinal en asa ileal, no
se aplicó el VIT en el
acto quirúrgico y se mantuvo
con dieta para alimentos sólidos e hidratación oral a
tolerancia(inmediatamente a la cirugía); a las 48 horas se practicó la segunda laparotomía exploradora con la
primera resección de la anastomosis, ésta fue llevada a estudio de microscopía
óptica y electrónica, para determinar los cambios histológicos a nivel de la
línea de sutura, se realizó la tercera laparotomía a los tres días de la
segunda laparotomía, con segunda resección de la línea de anastomosis, se realiza
nueva anastomosis. Llevando el
biomodelo a cuarta laparotomía exploradora a los siete días de la tercera
laparotomía, se reseca la línea de anastomosis, siendo esta la tercera muestra
de línea de anastomosis(tres por cerdo)
al finalizar la resección se sacrificó el
animal con una dosis letal de cloruro de potasio
(KCL) vía intravenosa.
Grupo
experimental de 17 cerdos: Se realizó laparotomía media exploradora con identificación de asa ileal, se practica
resección intestinal y anastomosis intestinal termino-terminal en un solo plano
con material absorbible Poliglactin 910(Vicryil ®), se colocan clamps de
coprostasis tanto distal como proximal a
la anastomosis a una distancia de cinco centímetros de ella, mediante punción con
aguja 21 entre los dos clamps se aplica el VIT
( 10 minutos), al terminar de administrar el VIT se retiran los clamps y se procede a la síntesis de la pared abdominal del biomodelo. Posterior al acto quirúrgico son
enviados al Bioterio de la
Escuela de Medicina José María Vargas, con hidratación
oral e ingesta de alimentos at libitium.
Transcurrido 48 horas, nueva laparotomía
exploradora, se identifica la anastomosis ileal, se le realiza la resección de
la misma enviándola para estudio
histológico y electrónico (línea de sutura), se practica anastomosis con
la misma técnica anteriormente descrita y con aplicación del VIT( 10 minutos), a las 96 horas de la
última cirugía, nueva laparotomía exploradora con resección de la anastomosis y
estudio histológico de la misma, se procede a
nueva anastomosis intestinal con aplicación del VIT (10 minutos) como fue descrito, igual procedimiento se practica
a los siete días de la última cirugía,
en esta cuarta cirugía luego de la resección de la anastomosis se sacrifica
el animal. Se
comienzó el estudio en el mes de Noviembre de
2009. En primer orden determinación del VIT
y VID, posteriormente se estudia al grupo control, y por último el grupo
experimental, con fecha de culminación de la fase experimental en el mes de
Julio de 2010. Todos los
biomodelos se mantuvieron en el mismo ambiente del Bioterio de la Escuela de Medicina José
María Vargas; con un área aproximada de 12 metros cuadrados,
para su alimentación se le suministró agua at libitun y como alimento cerdarina ®
250 gramos
promedio por animal por día, se mantuvo luz artificial blanca durante el día y
en oscuridad durante la noche. Con un
máximo de seis biomodelos en el
Bioterio, cada uno de ellos con una
estancia de 12 días mínimo en el Bioterio. Los biomodelos
fueron llevados a cirugía en número de dos por día. Durante el post
operatorio se administró antibioticoterapia por vía intramuscular enfloroxacina
(Bactrinol ®) 1,5 cc día y como analgésico post operatorio inmediato metamizol 1
cc intramuscular. Todos los animales se enviaron al mismo ambiente de donde
procedían, permaneciendo con los cerdos
no intervenidos. Se administró la misma cantidad de agua at libitun y
Cerdarina ®, al grupo total de animales. Las
muestras tomadas de la línea de sutura de las anastomosis eran colocadas en
envases de plástico con formol al 10%, y fueron
procesadas por el Servicio de Anatomía Patológica del Hospital Vargas de
Caracas, los cortes histológicos fueron realizados con tinción de hematoxilina eosina y con coloración de
tricrómico de Masson para visualizar las fibras de colágeno. Los cortes para
microscopía electrónica se enviaron en glutaraldehido al 2% a la Unidad de
Microscopía Electrónica de la Escuela José María Vargas de la Universidad
Central de Venezuela, y fueron evaluados de acuerdo a
los siguientes criterios: inflamación (células
presentes en cantidad), edema y fibrosis. Límites de la evaluación: Desde la muscular de la
mucosa, toda el espesor de la submucosa, hasta
la serosa intestinal. La ausencia de cualquiera de los tres parámetros
se tomó como 0 y la presencia de ellos como + positivo (+, ++, +++) a medida
que en mayor cantidad es su presencia (inflamación, edema, fibrosis) mayor número de cruces.