Los sujetos experimentales fueron 30 ratas machos de la cepa Sprague Dawley de peso entre 250-300 gramos, mantenidos en un ritmo luz:oscuridad 12:12 horas y alimentados ad libitum. Los animales fueron anestesiados con una solución de uretano (Ethyl Carbamate), a una dosis de 1 gr/Kgr de peso, vía intraperitoneal. Una vez el animal profundamente dormido, lo cual se comprobó por la arreflexia corneal, se colocó en un aparato estereotáxico con fijación craneana, luego se procedió a realizar una craneotomía de acuerdo a las coordenadas del atlas para el cerebro de ratas (12), usando como punto de referencia el Bregma. Se realizaron registros independientes con dos tipos de microelectrodos: Microelectrodos de vidrio borosilicato, llenos con una solución 2.5 M de azul de pontamina, y cuya resistencia medida con un voltímetro digital convencional fue de 4 a 10 MΩ. Microelectrodos de Tungsteno (W.P.I®) de 1MΩ de resistencia adosado a una microcánula de acero (ø 100 μm) alineados punta con punta. Con ayuda de un micromanipulador se colocaban los microelectrodos en la zona de registro en el giro dentado de la Formación Hipocámpica, de acuerdo a las siguientes coordenadas: AP = 3.3 – 4.3; L = 1-2 DV = 3 – 4. Previo a la colocación del microelectrodo de metal en la zona de registro en el giro dentado, la cánula metálica y el tubo plástico que la conectaba a una inyectadora (Hamilton®) de 1 μL, fueron llenados y purgados con la solución de la droga a inyectar. Los microelectrodos, fueron conectados a un pre-amplificador (Mentor® N-950). La señal obtenida en forma independiente de cada giro dentado, fue amplificada por medio de un amplificador (Tektronix®, AM502), y registrada en forma continua a través de una tarjeta genérica de sonido de dos canales con una velocidad de muestreo de 48 Kc/s conectada a una computadora Pentium que disponía de un programa editor de señales de audio (CoolEdit 1.5 and 95, syntrillium). Típicamente se registró 1 minuto de actividad control, luego se aplicó el estímulo nocivo (EN) el cual consistió en introducir la parte final de la cola en un vaso con agua a 54 oC por 10 segundos, habiendo transcurrido de 3 a 4 minutos se inyectó 0.2 µL de una de las drogas en la zona de registro del giro dentado, el siguiente EN se aplicó 30 segundos después de haber terminado la inyección. Todas las drogas fueron preparadas en solución fisiológica 0,9 % NaCl, manteniéndose la isosmolaridad de las soluciones finales. Solución de sulfato de Atropina (Sigma) (PM: 676.8) 0,5 mgrs/mL; Solución de Cloruro de Acetilcolina (Sigma), ACh; (PM: 201.7) 1 mgr/mL; Solución de Lidocaina® al 2%. Una vez concluido cada experimento se procedió a marcar la zona de registro, haciendo pasar una corriente a través de los microelectrodos. En el caso de los microelectrodos de vidrio llenos con azul de pontamina (2.5 M), se pasó una corriente negativa de 50 μAmp., durante 10 min. Para determinar el área de inyección, en algunos casos una vez concluido un registro de la actividad neuronal, se retiró el microelectrodo con su cánula y se procedió a llenar la cánula con azul de pontamina, luego se realizó un nuevo registro utilizando las mismas coordenadas del estereotáxico del registro anterior. Una vez colocado el microelectrodo en el giro dentado, y verificada la descarga neuronal, se inyectó 0.2 µL de azul pontamina. Luego se extrajo el cerebro y se fijó en formaldehído al 10 %. Posteriormente se realizaron cortes de 100-150 μm utilizando un Críostato, cada corte así obtenido, fue observado bajo microscopio de luz para ubicar la marca dejada por el colorante. Cada señal adquirida fue filtrada con un filtro pasa banda de 0.3 a 5 KHz. Se evaluaron aquellas espigas con la misma forma y duración de 1 mseg, utilizando el programa g-prime. La duración se determinó fijando en primer lugar un nivel basal de referencia, el inicio de la espiga se tomo justo al borde donde comenzaba la deflexión negativa de la espiga, el final cuando la espiga alcanzaba nuevamente el nivel basal. La actividad neuronal se expresó como la frecuencia de descarga en espigas/seg. La media y la desviación estándar de los cambios fueron cuantificados y graficados utilizando el programa GraphPad Prisma 4. Los datos obtenidos se compararon aplicando la prueba estadística “t de Student” para muestras no pareadas. Se consideraron estadísticamente significativos cuando el valor de p fue menor de 0,05.