Los 61 casos estudiados en este trabajo, fueron recibidos para su evaluación histológica e inmunohistoquímica en el Laboratorio de Patología Molecular NOVAPATH, en Caracas, Venezuela, durante los años 2000, 2001 y los tres primeros meses del año 2002. En casi todos los casos se recibió el material ya incluido en parafina; ocasionalmente se recibió material recién fijado en formol al 10% para ser procesado histológicamente. En algunas ocasiones fue necesario reincluir en parafina las muestras recibidas en bloques con la finalidad de mejorar la calidad del material o de reorientar las lesiones, para luego hacer nuevos cortes de tres a cuatro micras y su ulterior procesamiento de rutina, para finalmente ser teñidos con hematoxilina y eosina y examinados con un microscopio de luz.

Después de la evaluación diagnóstica y cotejados los datos clínicos, se decidió en cada caso particular, hacer el estudio inmunohistoquímico con los anticuerpos adecuados de acuerdo con el diagnóstico diferencial planteado. En algunos casos, antes del estudio inmunohistoquímico, se realizó la coloración de PAS con el reactivo de Schiff usando la digestión con diastasa para la detección del glicógeno.

Los cortes de dos a cuatro micras fueron hechos en un micrótomo rotatorio y recogidos en láminas sialinizadas o recubiertas con poli-l-lisina y previo bloqueo de la peroxidasa endógena con peróxido de hidrógeno-metanol. Se utilizó para la recuperación antigénica una solución de citrato de sodio a pH 6, en una olla de presión dentro de un horno de microondas para elevar la temperatura a 100°C durante varios minutos. Se usó como cámara húmeda, un sistema de capilaridad de la casa Shandon y los anticuerpos usados fueron de DAKO a las diluciones correspondientes. Se examinó cada caso con una serie de anticuerpos de acuerdo con el diagnóstico planteado; de manera general se utilizaron los siguientes anticuerpos: CD34, Vimentina, Actina Muscular Específica, HHF35, Proteina S-100, PGP 9.5, CD31, Factor VIII, Desmina, Myo-D1, Inhibina, Calretinina, MelanA, HMB45, EMA y Queratina AE1-AE3.