Anatomía Patológica
Inmunohistoquímica diagnóstica en metástasis ováricas
Material y métodos
En el curso de los años 2000 al 2005 en el Laboratorio de Patología Molecular Novapath recibimos 71 muestras de tumores de ovario incluidas en parafina y remitidas para su estudio inmunohistoquímico. Este estudio se refiere a los casos de tumores metastáticos en los ovarios, tanto de primarios desconocidos como de metástasis de primarios ováricos contralaterales, los cuales en total sumaron 18 casos. En la Tabla No 1 se señalan los casos de tumores metastáticos y sus diagnósticos. De los bloques de material incluido en parafina, se hicieron cortes de dos a tres micras que fueron procesados por métodos histológicos de rutina y al final se tiñeron con hematoxilina y eosina para ser examinados con el microscopio de luz. Después de la evaluación diagnóstica del tejido examinado en cortes teñidos con hematoxilina-eosina y cotejados los datos clínicos, se decidió en los casos ya señalados, hacer el estudio inmunohistoquímico. Cortes de dos a tres micras, fueron hechos en un micrótomo rotatorio y recogidos en láminas cubiertas con Poli-L-lisina. Se realizó un previo bloqueo de la peroxidasa endógena con 0.3% de peróxido de hidrógeno-metanol. Se realizaron lavados con Tris-bufferado-salino (TBS). La dilución utilizada varió para cada anticuerpo utilizado; los anticuerpos y las diluciones utilizadas son señaladas en la Tabla No 3. Se utilizó para la recuperación antigénica una solución de EDTA a pH 9.2, en olla de presión dentro de un horno de microondas para elevar la temperatura durante 10 a 15 minutos. Se usó como cámara húmeda un sistema de capilaridad de la casa Shandon y el revelado se hizo con el sistema de Streptavidina-peroxidasa (LSAB+System-HRP) de DAKO. Los cortes se contrastaron con hematoxilina de Mayer.
Los anticuerpos utilizados en este trabajo fueron: Queratina 7, Queratina 20, Queratina AE1/AE3, Queratina 34βE12, Antígeno de membrana Epitelial (EMA), Antígeno Carcinoembrionario (CEA), Calretinina, Alfa Inhibían, WT-1, Receptores de Estrógenos y Receptores de Progesterona, HER2/neu, E-cadherina, Vimentina, CD10, Ki67, Factor de Proliferación Nuclear (PCNA), Tiroglobulina, Alfa Feto Proteína, HEP, CD45(ALC), CD20, CD45ro, S100, HMB45, Enolasa Neuronal Específica, Cromogranina, Sinaptofisina y TTF-1. |