Julio-Septiembre 2010 43
ISSN 1317-987X
 
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Micología
Presencia de dermatofitos en niños de una unidad educativa del municipio Naguanagua, edo. Carabobo, Venezuela. Durante el perí­odo 2009.

Materiales y métodos

Se solicitó permiso a la Dirección de la Unidad Educativa, una vez otorgado éste, se convocó a los representantes de los niños a una reunión en la cual se les explicó el alcance y objetivo del estudio y se les hizo entrega del consentimiento informado. A los hijos de aquellos representantes que aceptaron que sus hijos participaran en el estudio y firmaron el consentimiento, se les realizó una observación clí­nica para determinar las lesiones sospechosas a infecciones por dermatofitos, quedando conformada la muestra por 35 niños en edades comprendidas entre 3 y 8 años de ambos géneros que presentaran lesiones en piel, pelos y uñas. De los 35 niños seleccionados 25 eran del género masculino y los 10 restantes del género femenino. Se tomaron muestras de toda lesión sugestiva en piel que fuese una erupción de color rosa o roja con formación o no de placas redondeadas con zonas claras en el centro, en el cuero cabelludo se tomaron muestras de toda erupción roja descamativa más bien pruriginosa, o si no placas de calvicie sin erupción, mientras que las muestras de uña se tomaron aquellas que presentaron un color amarillento y una ligera descamación. Para la obtención de la muestra en las lesiones en el cuero cabelludo se examinó la zona afectada con la lámpara de Wood en busca de zonas fluorescentes que indicaran la presencia de dermatofitos, los cuales producen una fluorescencia amarillo verdosa cuando incide sobre él la luz ultravioleta filtrada a través de un cristal de Wood, que ayuda a delimitar claramente los bordes activos de la lesión, luego se procedió a desinfectar la zona con alcohol y a extraer cabellos cortos y gruesos con una pinza estéril, se tomaron de 5 a 8 cabellos (9,10). Se realizó examen al fresco con KOH al 10% a los pelos afectados, para observar el tipo de ataque (ecto o endothrix). Además, parte de la muestra se sembró (cuatro tubos por cada una) en el medio de agar lactritmel y se dejaron a temperatura ambiente con revisión periódica cada 7 dí­as por 3 semanas (11). Las muestras de piel se obtuvieron por raspados de las lesiones con una hoja de bisturí­ estéril, se colocaron las escamas obtenidas en placas de petri estériles. Parte del material clí­nico se colocó entre una lámina portaobjeto y cubreobjeto con una gota de la solución de KOH, para permitir una mejor visualización (12), el resto de la muestra obtenida se sembró en el medio de agar lactritmel y se dejaron a temperatura ambiente con revisión periódica cada 7 dí­as por 3 semanas (11). Para la obtención de las muestras de uñas, se realizó limpieza previa cuidadosa de las uñas con alcohol de 70 º, mediante la técnica de raspado con bisturí­ y corte de las uñas con pinza gubia. Se hizo un raspado profundo partiendo del extremo distal al proximal y recolectando el detrito subungueal de la parte pigmentada, distrófica y más débil de la uña, obteniendo la muestraentre el lí­mite de la región sana y la infectada, y recogida en placas de petri estériles (9,10, 13). Parte del material se utilizó para el examen directo al fresco con KOH al 20%, observándose al microscopio óptico con objetivos de 10X y 40X, buscando la presencia de hifas hialinas, ramificadas y septadas. El resto de la muestra fue sembrada en 4 tubos de agar Lactritmel (11) y colocados a temperatura ambiente por 15 dí­as, con revisión periódica cada 7 dí­as. La identificación de las colonias se realizó por el aspecto macroscópico y microscópico, siguiendo criterios descritos (11, 14, 15). Para la identificación macroscópica de los hongos, se consideró el color de la superficie y reverso de la colonia, textura de la superficie (pulverulenta, lanosa, algodonosa, granular, plegada), diámetro alcanzado por la colonia y presencia de pigmentos (11,14-16). La morfologí­a microscópica de los hongos se realizó a través de un examen directo del cultivo utilizando solución Azul de Lactofenol: en donde se empleó la técnica de Campbell (17), seleccionando una colonia aislada, con la ayuda de un asa de siembra esterilizada. Se depositó el fragmento extraí­do sobre un portaobjetos el cual previamente contení­a una gota de azul de Lactofenol, posteriormente se cubrió con una lamina cubreobjetos presionándose suavemente para dispersar la colonia, la muestra estuvo disponible para su observación al microscopio, usando el objetivo de 40X (16).  El método de Microcultivo consistió en preparar una cámara húmeda estéril, usando para ello en una placa de Petri, en el fondo de ésta se agregó agua estéril y dos varillas de vidrio que sostení­a el portaobjeto, el cual a su vez posee en su superficie el bloque de agar, constituido por harina de maí­z como ingrediente principal de la formula, que ha sido previamente cortado, usando un bisturí­. La muestra se inoculó sobre este bloque, en cuatro cuadrantes, haciendo uso de una aguja bacteriológica forma de L. Sobre el bloque de agar ya inoculado se colocó una laminilla cubreobjetos y se llevó a incubación al menos por 7 dí­as a 25 ºC. Una vez terminado el periodo de incubación, se retiró el cubreobjetos y se colocó en una lámina, añadiéndosele una o dos gotas de azul Lactofenol, para el examen microscópico en objetivos de 10x y 40x observandose los micros y macroconidias. Una vez recogidos los datos se aplicó estadí­stica descriptiva y se construyeron tablas de frecuencias y porcentajes.




Continua: Resultados

Presencia de dermatofitos en niños de una unidad educativa del municipio Naguanagua, edo. Carabobo, Venezuela. Durante el perí­odo 2009.
Introducción
Materiales y métodos
Resultados
Discusión
Referencias

NOTA: Toda la información que se brinda en este artículo es de carácter investigativo y con fines académicos y de actualización para estudiantes y profesionales de la salud. En ningún caso es de carácter general ni sustituye el asesoramiento de un médico. Ante cualquier duda que pueda tener sobre su estado de salud, consulte con su médico o especialista.





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