Se incluyeron 85 individuos venezolanos de tercera generación (padres y abuelos venezolanos), no relacionados, mayores de 18 años, sin consideración de sexo, los cuales se agruparon en:

Grupo 1 (Pacientes con tuberculosis pulmonar): individuos con diagnóstico clí­nico de tuberculosis pulmonar, diagnosticados en el Servicio de Neumologí­a del Hospital José Ignacio Baldó del Algodonal. (Consulta externa y hospitalización).

Grupo 2 (Controles): individuos sanos seleccionados del personal del Servicio de Neumologí­a del Hospital José Ignacio Baldó del Algodonal, quienes han trabajado por más de 10 años en el servicio expuestos a infección por M tuberculosis (prueba de tuberculina o PPD positiva) y sin ningún tipo de manifestación clí­nica de la enfermedad al momento de la toma de muestra de sangre.

Criterios de Exclusión: Individuos con comorbilidades: diábetes, cáncer, SIDA, nefropatí­as, hepatopatí­as y condiciones asociadas: embarazo, alcoholismo o drogadicción.

Previo a la recolección de las muestras del grupo de pacientes y controles, se les solicitó la firma de un consentimiento informado aprobado por el Comité de Bioética del IVIC y del Hospital José Ignacio Baldó del Algodonal de Caracas.

Criterios para el diagnóstico de TB

Los pacientes fueron seleccionados de acuerdo a los criterios diagnósticos de la Norma Nacional Venezolana del Programa Nacional Integrado de Control de la Tuberculosis vigente, con exámenes de dos Baciloscopias (BK) positivo, sí­ntomas clí­nicos de TB y radiografí­as de tórax consistente con enfermedad activa ^(22,23).

Prueba de tuberculina en piel (PTP)

La prueba intradérmica de tuberculina (PT) fue realizada utilizando una Unidad de Tuberculina (0,1 ml) de Derivado Proteico Purificado (PPD) RT23 y las induraciones se midieron después 48 horas. Una medida >10 mm se consideró como positiva.

Genotipificación

El ADN genómico fue extraí­do de las células blancas de sangre periférica siguiendo el protocolo descrito por Bunce⁽²⁴⁾. La genotipificación de las variantes -1082 A/G, -819 C/T y "“592 A/C se realizó a través de la reacción en cadena de polimerasa con iniciadores de secuencia especí­fica (PCR-SSP), utilizando el estuche comercial Cytokine Genotyping Tray (One Lambda, Inc. Canoga Park, CA). Los productos amplificados fueron verificados en geles de agarosa al 2.5%

Análisis Estadí­stico

El estudio comparativo entre los pacientes infectados con M. tuberculosis e individuos sanos se realizó en base al cálculo de las frecuencias genotí­picas. Las diferencias entre grupos se estimó por la prueba de Χ²Mantel-Haenszel y la intensidad de la asociación se calculó como Odds Ratio (OR). Los valores de (p) se corrigieron multiplicándolos por el número de comparaciones hechas (corrección de Bonferroni) y se consideraron significativas cuando el valor de p<0,05.