Inmunología
Determinación de linfocitos T CD4 y CD8 en ni?os VIH positivos con terapia
Metodolog
1. Población de estudio y criterios de selección. Durante un periodo de tres a?os 2001-2003, se seleccionaron 50 pacientes pedi?tricos con infección por VIH de la Fundación Innocens,Maracaibo-Venezuela en edades comprendidas de 1 a 12 a?os. Esta investigación incluy? ni?os de todas las razas, sin distinción de sexo, y con tratamiento antirretroviral.
A todos los pacientes se les efectu? una Historia Cl?nica, realizada por médicos especialistas en el área con datos espec?ficos y completos.Los padres o tutores legales de todos los pacientes pedi?tricos dieron su consentimiento informadopor escrito según las Normas del C?digo de Bio?tica y Bioseguridad, Cap?tulos 2 y 3 (3).
Para participar en la investigación, los ni?os recibieron como beneficio la realización de todo el estudio cl?nico y de laboratorio sin costo alguno.
2. Toma de muestra y recuento de linfocitos T CD4 y CD8. A cada paciente se le tom? una muestra de aproximadamente 5cc de sangre venosa en tubos Vacutainer con EDTA. La muestra se utiliz? para la determinación de la subpoblación de linfocitos T CD4 y CD8 mediante citometría de flujo.
El recuento de los linfocitos T CD4 y CD8 (en combinación con la carga viral) es un fiel indicador del estado del paciente. El recuento de los linfocitos CD4 y CD8 se hizo directamente de una muestra de sangre usando un Cit?meto de Flujo FACS MANTAGE. Para ello se utiliz? Anticuerpo monoclonal de rata Anti CD4 (L-3T4) casa comercial BD Biosciences Phar Migen Technical y Anti-CD8 (Ly-2) Phar Migen Technical, los cuales fueron conjugados con R-Phycoerytrin (R-PE).
Esto permitió distinguir estas cálulas de las demás en la muestra y contarlas mientras pasaron por el detector del cit?metro. Para el análisis de la citometría de flujo se utiliz? el paquete Software de computadora WinMDI 2.8.
3. Tratamientos suministrados. Los tratamientos antirretrovirales suministrados a los ni?os fueron indicados por M?dicos Pediatras especialistas en el área. Esta terapia consisti? de tripletas de medicamentos que incluyeron dos inhibidores de transcriptasa inversa y un inhibidor de proteasa (Tabla 1).
Tabla 1.- Tratamientos antirretrovirales empleados en los pacientes pedi?tricos
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Inhibidores de Transcriptasa Inversa Anélogos a Nucle?sidos |
Inhibidores de Transcriptasa Inversa No Anélogos a Nucle?sidos |
Inhibidores de Proteasa |
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Zidovudina (AZT)
Stavudina (dT4)
Lamivudina (3TC)
Abacavir (Ziagen) |
Neviparine
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Nelfinavir
Lopinavir/Ritonavir(Kaletra)
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4. Anélisis estad?stico. Los resultados se analizaron a través del programa SPSS Windows, versión 11.0, 2.001, y se presentaron en forma de tabla de Distribución de Frecuencia. Estos se examinaron a través del Anélisis de Varianza (ANOVA), determiníndose los diferentes grupos con el Post-análisis de Tukey. La relación de las variables obtenidas en las determinaciones de cada población, se estudiaron em pleando el test de correlación de Pearson.
Se tom? como índice de confianza el 95%, consideríndose como significativo todo valor de probabilidad menor a 0,05 (p<0,05). |
