Enero-Marzo 2012 49
ISSN 1317-987X
 
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Neurociencia
Efecto de la indometacina sobre la expresión de proteínas y del canal de sodio Nav1.3 en el asta dorsal medular de ratas, inducidos por una inflamación periférica aguda

Resultados

Las bandas de migración electroforética de las muestras de proteínas obtenidas de cada ADM: izquierda (I) o derecha (D) de cada condición: control (c), inflamado (i) o inflamado y pretratado con indometacina (t) de animales, así como una muestra de calibración de pesos moleculares referenciales, se presentan en la figura 1. A pesar de que la corrida electroforética no fue totalmente homogénea, se puede observar como en Ic y Dc se revelaron 4 bandas ubicadas entre 250-120KDa y 3 bandas ubicadas entre 84-28KDa; en Ii se revelaron 5 bandas entre 250-120KDa y 3 bandas entre 84-28KDa. En Di e It se revelaron 7 bandas entre 250-120KDa y 3 bandas ubicadas entre 84-28KDa; por el contrario, en Dt se observaron 5 bandas por encima de 215 KDa y 4 bandas entre 84-28 KDa.

Figura 1: Electroforesis de proteínas totales de las ADM de las ratas controles y de los grupos A y B. Marcador de pesos moleculares (M), con sus respectivas bandas (215, 120, 84, 60, 39.2 y 28KDa); muestras del ADM ipsilateral (Ic) o contralateral (Dc) de ratas no inflamadas o controles; muestra del ADM ipsilateral (Ii) o contralateral (Di), posterior a la inflamación; muestra del ADM ipsilateral (It) o contralateral (Dt), posterior a la inflamación y pretratadas con indometacina.


Expresión de proteínas en las ADM

En la figura 2 se observan los cambios de la expresión proteica en el ADM ipsilateral a la inflamación. El proceso inflamatorio indujo un incremento generalizado de las mismas de +39,82%, en relación con el grupo control, manteniéndose los picos en los PM predominantes, pero más intensamente en las proteínas de PM>200. Llama la atención que el pretratamiento con indometacina, no solo produjo disminución de la expresión de las proteínas postinflamación (-33,57%), sino que además inhibió las proteínas constitutivamente expresadas en el grupo control, siendo este efecto más intenso para proteínas de PM<350. Por el contrario, en el ADM contralateral, el proceso inflamatorio redujo la expresión de proteínas totales en  -15%, suprimió las proteínas que estaban presentes en el grupo control en los picos de PM 160-320KDa, suprimió la expresión constitutiva de proteínas con PM de 20-80KDa e incrementó la expresión de aquellas con PM450KDa. La administración de indometacina favoreció el incremento de la expresión protéica de bajo PM (20-80KDa), mientras que en el resto de la curva se evidenció un incremento de la expresión en comparación al grupo inflamado e inclusive, un aumento en la densidad proteica total de +14,2% con respecto del grupo control (Figura 3).

Figura 2: Diferencias en la expresión de proteínas totales de las ADM ipsilaterales a la inflamación periférica de todos los grupos experimentales (Ic, Ii, It). n=5; PM= peso molecular; MA= average móvil de 10 términos.

Figura 3: Diferencias en la expresión de proteínas totales de las ADM contralaterales a la inflamación periférica de todos los grupos experimentales (Dc, Di, Dt). n=5; PM= peso molecular; MA= average móvil de 10 términos.

Expresión de proteínas de las ADM en condiciones controles

La diferencia de proteínas en el grupo control (Dc-Ic) muestra una mayor expresión de las mismas en las ADM contralaterales con PM entre 260-340KDa (Figura 4). A pesar de la magnitud de la expresión proteica hallada, esta no fue significativa.

Figura 4: Diferencias en la expresión de proteínas totales entre las ADM ipsi y contralaterales de ratas controles (Dc-Ic) expresadas como unidades densitométricas relativas (%ud), n=5; niveles de confiabilidad P5 y P95. PM: peso molecular; MA: average móvil de 10 términos.

Expresión de proteínas de las ADM en condiciones de inflamación periférica unilateral

El proceso inflamatorio incrementó la expresión de proteínas con PM de 180-260KDa del ADM ipsilateral. Por el contrario, en el ADM contralateral aumentaron las proteínas con PM comprendidos entre 580-640KDa (Figura 5).

Figura 5: Diferencias en la expresión de proteínas totales entre las ADM ipsi y contralaterales en las ratas del grupo A (Di-Ii) expresadas como unidades densitométricas relativas (%ud), n=5; niveles de confiabilidad P5 y P95. PM: peso molecular; MA: average móvil de 10 términos.

Expresión de proteínas de las ADM en condiciones de inflamación periférica unilateral pretratadas con indometacina

En el grupo B, se registró una inhibición a nivel del ADM ipsilateral, de la expresión de proteínas con PM720KDa. Por el contrario, la expresión de las mismas en el ADM contralateral aumentó, particularmente en dos bandas de proteínas con PM 4 a 8KDa y de 340 a 360KDa (Figura 6).

Figura 6: Diferencias en la expresión de proteínas totales de las ADM ipsi y contralaterales previo tratamiento con indometacina (Dt-It) expresadas como unidades densitométricas relativas (%ud), n=5; niveles de confiabilidad P5 y P95. PM: peso molecular; MA: average móvil de 10 términos.

Expresión de proteínas del canal Nav1.3 en las ADM

De acuerdo a los niveles de especificidad del Western blot y bajo las condiciones experimentales descritas, no se observó la presencia de bandas reactivas que sugirieran la expresión del canal Nav1.3.
Efecto de la indometacina sobre la expresión de proteínas y del canal de sodio Nav1.3 en el asta dorsal medular de ratas, inducidos por una inflamación periférica aguda
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NOTA: Toda la información que se brinda en este artículo es de carácter investigativo y con fines académicos y de actualización para estudiantes y profesionales de la salud. En ningún caso es de carácter general ni sustituye el asesoramiento de un médico. Ante cualquier duda que pueda tener sobre su estado de salud, consulte con su médico o especialista.





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