Inmunología
Desarrollo de una vacuna contra la Leishmaniasis cutánea en sus aspectos de inmunoterapia y posible aplicación en inmunoprofilaxis
Aplicación de la Inmunoterapia
Se inició
con un estudio comparativo, ciego y al azar, para un observador independiente,
en dos grupos, uno tratado con IT (mezcla de parásitos muertos de Leishmania
brasiliensis más BCG viable), y el otro con QT, a base de antimonial
pentavalente. Estos grupos fueron suficientemente grandes como para que una
diferencia de 15% fuera significativa, con un error alfa de 0,05, un error beta
de 0,50 y un grupo mínimo de 34 participantes. Esta experiencia fue coordinada
por un investigador independiente perteneciente a la Organización Panamericana
de la Salud, el Dr. Pedro Luis Castellanos (7).
Los 94 pacientes
incluidos en ese estudio fueron de una misma área, y el período
del estudio fue de 12 meses. Los principales requerimientos fueron: pacientes
mayores de 12 años, con lesiones localizadas de menos de un año
de evolución, no tener contraindicaciones para el tratamiento y firmar
un formulario de consentimiento informado. Previamente se obtuvo la aprobación
del Comité Ético del IB para realizar este trabajo.
Los resultados
mostraron tasas de curación similares (94%) tanto para los pacientes
con IT como QT. En cambio, los efectos secundarios fueron escasos (5,8%) y leves
en el grupo de IT, mientras que en el grupo de QT fueron frecuentes (52,4%)
y a menudo severos.
Posteriormente
se realizó otro trabajo con 217 casos de un solo foco endémico,
bajo las mismas condiciones que el anterior (mayores de 12 años, lesiones
localizadas de menos de un año de evolución, confirmación
parasitológica, sin contraindicaciones para QT o IT y consentimiento
informado por escrito (8).
Los pacientes
fueron evaluados por medio de un examen clínico general, pruebas de laboratorio
y pruebas intradérmicas con Leishmanina y Tuberculina. Posteriormente
fueron distribuidos al azar en dos grupos control: uno que recibiría
BCG solo (n=42) y otro a ser tratado con QT (n=51), y en un grupo activo (n=124).
Los pacientes fueron evaluados cada 2 semanas por un observador independiente.
Los resultados de los grupos con QT e IT fueron comparables (>90% de curaciones).
La tasa de curación fue mucho menor en el grupo con BCG solo (42%). La
tasa de efectos secundarios fue de 49% en el grupo con QT, y menor de 5% en
los grupos con IT y BCG. Este estudio también incluyó 11 pacientes
con formas intermedias de la enfermedad, los cuales mostraron curación
o notable mejoría, y 10 pacientes con leishmaniasis difusa, 9 de los
cuales también mostraron marcada mejoría clínica.
Durante
el período comprendido entre 1990-1999 se aplicó IT a la LCL con
carácter experimental en Venezuela. Un total de 11532 casos de LCL recibieron
una mezcla de promastigotes de Leishmania muertos por calor más BCG liofilizado.
De estos pacientes se evaluaron detalladamente 5341 casos, provenientes de diferentes
áreas del país. La curación clínica varió
entre 91,2% y 98,7%, con un promedio de 95,7%. Las reacciones adversas fueron
muy moderadas y todas debidas a la respuesta al BCG. La IT falló en 143
casos, incluyendo 54,5% con lesiones típicas de LCL y 45,5% con lesiones
intermedias no mucosas. El número de fracasos en los casos de LCI sugiere
que en dicho grupo se debe utilizar un tratamiento mixto (IT + QT) o aumentar
el número de dosis de IT. (11, 12)
El alto
porcentaje de curaciones clínicas logradas con la IT, asociada a muy
pocos efectos secundarios y un bajo costo del tratamiento, debido a que no es
necesario utilizar exámenes de laboratorio, ni la infraestructura necesaria
para administrar inyecciones diarias, apoyan el uso de rutina de la IT en el
medio rural, donde no existen estas facilidades.
En la Tabla
1 se presentan los datos numéricos de los casos con LCL de diferentes
estados de Venezuela tratados con IT.
En el curso del desarrollo de la IT en el Instituto de Biomedicina,
y por el hecho de haberse presentado fallas a la IT con promastigotes autoclavados
de Leishmania brasiliensis más BCG, en algunos casos de LCL, y frecuentemente
en casos de LCI (cutánea y mucosa), se realizaron investigaciones para
aumentar la efectividad del tratamiento en estas formas de la enfermedad. En
este sentido, se realizaron estudios, por medio de electroforesis, de las proteínas
del parásito leishmánico tratado a diferentes temperaturas, determinándose
que la pasteurización a 56ºC durante 30 minutos producía
la muerte del parásito, con una discreta modificación de las proteínas
del parásito leishmánico pasteurizado, en comparación con
las proteínas del parásito no tratado. Con esta vacuna modificada,
se realizó un estudio experimental en ratones BALB/c inoculados con L.
brasiliensis, observándose ausencia de fenómenos secundarios y
una respuesta más efectiva en comparación con la vacuna autoclavada.
Gracias
a un convenio con el Instituto Nacional de Higiene, todos los lotes de vacuna
pasteurizada fueron analizados en relación a muerte del parásito,
esterilidad y toxicidad, determinándose que eran aptas para su uso en
seres humanos.
Se realizaron
cuatro estudios con la vacuna pasteurizada:
a) Inmunoterapia
Fase I
b) Inmunoprofilaxis Fase I
c) Inmunoprofilaxis Fase II
d) Inmunoterapia en un pequeño grupo de pacientes que no respondían
al tratamiento antimonial, 3 con lesiones de LCD incipientes y 4 con lesiones
mucosas de LCI.
Para esta
etapa de la investigación, los objetivos fueron:
Inmunoprofilaxis
• Evaluar la seguridad del producto propuesto en humanos
• Evaluar la capacidad del producto para generar respuesta inmunológicamente
demostrable en humanos
• Determinar la mejor concentración de promastigotes requeridas
para generar una adecuada respuesta inmunológica
Inmunoterapia
• Evaluar Seguridad, Tolerancia e Inmunogenicidad del antígeno
de promastigotes inactivados por pasteurización más BCG, desarrollado
en el Instituto de Biomedicina de Caracas Venezuela, en pacientes con diagnostico
parasitológico de leishmaniasis cutánea localizada.
|
