Se realizó un estudio experimental, prospectivo, comparativo, para valorar las fases de cicatrización temprana en anastomosis de intestino delgado de cerdos a quienes se les produjo un aumento de la presión intraluminal con solución salina al 0,9%. El presente estudio se llevó a cabo en la unidad de Investigación Quirúrgica de la Escuela de Medicina José Marí­a Vargas de la Facultad de Medicina de la Universidad Central de Venezuela, con autorización del Comité de í‰tica de la Escuela de Medicina José Marí­a Vargas para la realización de los procedimientos quirúrgicos.

Protocolo:

Se utilizaron cerdos de la raza Large White, lechones de 20 kilogramos de peso (machos y hembras) tres de ellos para la determinación del Volumen Intraluminar de dehiscencia (VID) y del Volumen Intraluminar de Tolerancia (VIT). Estos tres cerdos son sacrificados al finalizar la determinación de los volúmenes. Cuatro cerdos para el grupo control y 17 cerdos para el grupo experimental. Con un total de 21 cerdos en el grupo estudio.

Determinación del volumen intraluminar de dehiscencia VID y del volumen intraluminar de tolerancia VIT: A cada uno de los tres cerdos se les realizó laparotomí­a media exploradora, con identificación de un segmento de asa ileal (Figura 1), a dicho segmento se le practica resección de cinco centí­metros y seguidamente anastomosis termino-terminal en un solo plano con material absorbible Poliglactin 910 (Vicryl ®) 4-0 , se colocan clamps de coprostasis tanto distal como proximal a la anastomosis, a una distancia de cinco centí­metros de ella , a través de una inyectadora de 10 ml con aguja número 21 se administra por punción solución salina al 0,9%, se mantiene la colocación de los clapms por un perí­odo de 10 minutos y posteriormente son retirados. En primera instancia se calcula el volumen intraluminar de dehiscencia que fue de 40 ml de solución 0,9%,(comienzo de filtración de la solución a través de la anastomosis) posteriormente se realiza, en otro segmento ileal una nueva resección y anastomosis con la misma técnica, en esta anastomosis calcularemos el volumen intraluminar de tolerancia a través de nueva punción con aguja 21, (distensión máxima sin llegar a filtrar a través de la anastomosis) el volumen determinado fue de 30 ml de solución salina al 0,9% VIT

VID= 40 ml VIT= 30 ml.

Grupo control de 4 cerdos. Todos los grupos fueron premedicados ví­a intramuscular con: Ketamina 40 mg x Kg. Xilacina 4 mg x Kg. y Atropina 0,5 mg x 10 Kg. Durante el acto quirúrgico se utilizó una máquina Ohio con vaporización de enflurano Ethrane ®. Anestesia general inhalatoria ví­a mascara y oxigeno 4 litros, fentanyl 0,5 cc ví­a intramuscular y se les realizó laparotomí­a exploradora según las técnicas standard, y siguiendo las normas de asepsia y antisepsia correspondientes a la Unidad de Investigación Quirúrgica. Al grupo control se le practicó resección y anastomosis intestinal en asa ileal, no se aplicó el VIT en el acto quirúrgico y se mantuvo con dieta para alimentos sólidos e hidratación oral a tolerancia(inmediatamente a la cirugí­a); a las 48 horas se practicó la segunda laparotomí­a exploradora con la primera resección de la anastomosis, ésta fue llevada a estudio de microscopí­a óptica y electrónica, para determinar los cambios histológicos a nivel de la lí­nea de sutura, se realizó la tercera laparotomí­a a los tres dí­as de la segunda laparotomí­a, con segunda resección de la lí­nea de anastomosis, se realiza nueva anastomosis. Llevando el biomodelo a cuarta laparotomí­a exploradora a los siete dí­as de la tercera laparotomí­a, se reseca la lí­nea de anastomosis, siendo esta la tercera muestra de lí­nea de anastomosis(tres por cerdo) al finalizar la resección se sacrificó el animal con una dosis letal de cloruro de potasio (KCL) ví­a intravenosa.

Grupo experimental de 17 cerdos: Se realizó laparotomí­a media exploradora con identificación de asa ileal, se practica resección intestinal y anastomosis intestinal termino-terminal en un solo plano con material absorbible Poliglactin 910(Vicryil ®), se colocan clamps de coprostasis tanto distal como proximal a la anastomosis a una distancia de cinco centí­metros de ella, mediante punción con aguja 21 entre los dos clamps se aplica el VIT ( 10 minutos), al terminar de administrar el VIT se retiran los clamps y se procede a la sí­ntesis de la pared abdominal del biomodelo. Posterior al acto quirúrgico son enviados al Bioterio de la Escuela de Medicina José Marí­a Vargas, con hidratación oral e ingesta de alimentos at libitium. Transcurrido 48 horas, nueva laparotomí­a exploradora, se identifica la anastomosis ileal, se le realiza la resección de la misma enviándola para estudio histológico y electrónico (lí­nea de sutura), se practica anastomosis con la misma técnica anteriormente descrita y con aplicación del VIT( 10 minutos), a las 96 horas de la última cirugí­a, nueva laparotomí­a exploradora con resección de la anastomosis y estudio histológico de la misma, se procede a nueva anastomosis intestinal con aplicación del VIT (10 minutos) como fue descrito, igual procedimiento se practica a los siete dí­as de la última cirugí­a, en esta cuarta cirugí­a luego de la resección de la anastomosis se sacrifica el animal. Se comienzó el estudio en el mes de Noviembre de 2009. En primer orden determinación del VIT y VID, posteriormente se estudia al grupo control, y por último el grupo experimental, con fecha de culminación de la fase experimental en el mes de Julio de 2010. Todos los biomodelos se mantuvieron en el mismo ambiente del Bioterio de la Escuela de Medicina José Marí­a Vargas; con un área aproximada de 12 metros cuadrados, para su alimentación se le suministró agua at libitun y como alimento cerdarina ® 250 gramos promedio por animal por dí­a, se mantuvo luz artificial blanca durante el dí­a y en oscuridad durante la noche. Con un máximo de seis biomodelos en el Bioterio, cada uno de ellos con una estancia de 12 dí­as mí­nimo en el Bioterio. Los biomodelos fueron llevados a cirugí­a en número de dos por dí­a. Durante el post operatorio se administró antibioticoterapia por ví­a intramuscular enfloroxacina (Bactrinol ®) 1,5 cc dí­a y como analgésico post operatorio inmediato metamizol 1 cc intramuscular. Todos los animales se enviaron al mismo ambiente de donde procedí­an, permaneciendo con los cerdos no intervenidos. Se administró la misma cantidad de agua at libitun y Cerdarina ®, al grupo total de animales. Las muestras tomadas de la lí­nea de sutura de las anastomosis eran colocadas en envases de plástico con formol al 10%, y fueron procesadas por el Servicio de Anatomí­a Patológica del Hospital Vargas de Caracas, los cortes histológicos fueron realizados con tinción de hematoxilina eosina y con coloración de tricrómico de Masson para visualizar las fibras de colágeno. Los cortes para microscopí­a electrónica se enviaron en glutaraldehido al 2% a la Unidad de Microscopí­a Electrónica de la Escuela José Marí­a Vargas de la Universidad Central de Venezuela, y fueron evaluados de acuerdo a los siguientes criterios: inflamación (células presentes en cantidad), edema y fibrosis. Lí­mites de la evaluación: Desde la muscular de la mucosa, toda el espesor de la submucosa, hasta la serosa intestinal. La ausencia de cualquiera de los tres parámetros se tomó como 0 y la presencia de ellos como + positivo (+, ++, +++) a medida que en mayor cantidad es su presencia (inflamación, edema, fibrosis) mayor número de cruces.