En cuanto a los cultivos, sólo se obtuvo crecimiento en dos de las muestras, las cuales correspondían a pacientes que no habían recibido tratamiento. El crecimiento se observó al quinto día en agar sangre (AS) y entre los 8 y 12 días en medio Löwenstein Jensen (L-J). Las colonias en AS se caracterizaron por ser rugosas, estrelladas, adheridas al medio, hemolíticas y de color crema-pardo. Mediante la coloración de Gram se caracterizaron como bacilos grampositivos cortos, algunos con tendencia a la ramificación, mientras que en la coloración ZN se observaron como bacilos no ácido-alcohol resistente. Estas colonias se subcultivaron en los medios de Sablac, Agar cerebro corazón y L-J incubados a diferentes temperaturas ( 30ºC , 37ºC y 45ºC ). En los dos primeros medios, se observó crecimiento al tercer día a las diferentes temperaturas, mientras que en L-J hubo crecimiento entre los siete y doce días, y solo a 37ºC . Sobre la base de las características tintoriales y morfológicas de las colonias mencionadas, las mismas se identificaron presuntamente como Nocardia spp.

En cuanto al crecimiento en el medio L-J se observaron tres tipos de colonias con morfologías aparentemente diferentes: una de color crema de bordes irregulares, convexa y seca, otra de color crema, rastrera y la tercera de bordes regulares, de color beige. En la coloración ZN se observaron BAR cortos, fusiformes, bipolares y algunos presentaban corpúsculos. De los tres tipos de colonias se lograron separar dos, las cuales se identificaron como Mycobacterium spp y Nocardia spp respectivamente. En el tercer tipo de colonia se evidenció una mezcla de BAR, los cuales no pudieron ser separados bacteriológicamente.

Las cepas presuntamente identificadas como Nocardia spp y Mycobacterium spp , fueron posteriormente identificadas a nivel de especie en los Departamentos de Micología y Bacteriología del Instituto Nacional de Higiene y en el Laboratorio de Micobacterias de División de Tuberculosis y Enfermedades Pulmonares Ministerio de Salud y Desarrollo Social como Nocardia brasiliensis y M. chelonae respectivamente.

La M. chelonae aislada fue estudiada por métodos de diagnóstico molecular, mediante amplificación por PCR de las secuencias IS 6110, mpt40 y hsp65 dando resultados negativos para IS 6110 y mtp40 y positivos para la secuencia hsp65. El patrón de restricción polimórfica fue compatible con M. chelonae (Figura 2). La colonia que contenía la mezcla de dos tipos de BAR, también se sometió a estudios de PCR, obteniéndose amplificación positiva para las secuencias IS 6110 y mtp40 específicas del complejo tuberculoso y de M. tuberculosis respectivamente (Figura 2). Resultados similares se observaron en las dos muestras procesadas directamente (secreción purulenta y biopsia de piel).

Debido a estos hallazgos, las pacientes fueron incluídas en el tratamiento antituberculoso recomendado por el Programa Nacional de Control de Tuberculosis y con trimetroprin sulfametoxazol, con buena respuesta terapéutica, sin efectos colaterales de importancia. El tratamiento se hizo extensivo a las demás pacientes y en todas ellas la respuesta fue satisfactoria