El
presente estudio se ha realizado en 15 pacientes de sexo femenino. Utilizamos
la hibridación in situ como método para detectar los diversos tipos de VPH. Aunque no conocemos referencias sobre alteraciones
del examen ginecológico de las pacientes, sin embargo tenemos
la información de que en ninguna de ellas se reportó positividad para el VIH.
Para su estudio histológico, las lesiones anales
fueron siempre examinadas diferenciando entre las que se originan en el canal
anal y las que se originan en la margen anal o en la piel perianal. Los 15
casos examinados correspondieron a lesiones neoplásicas del canal anal. El
canal anal se divide en tres zonas que se hallan tapizadas por distintos tipos
de mucosa; la región superior es llamada zona colorectal y está recubierta por
mucosa del tipo colorectal; la zona intermedia es denominada zona transicional
anal (Z T A), suele extenderse unos 10 mms., por encima de la línea pectínea y
suele estar tapizada por epitelio transicional anal, pero también pueden estar
presentes islotes de epitelio colorectal y escamoso. Por debajo de la línea
pectínea se halla la zona escamosa tapizada por epitelio escamoso que empieza a
queratinizarse en la apertura anal y a continuación se halla la piel perianal
que contiene pelos y glándulas sebáceas, ecrinas y apocrinas. Ver resultados
histológicos de algunos casos en la Figura
1.
Figura 1 : 1. Cáncer del canal
anal No 3: se observa el epitelio de la zona de transición H&E 200X. 2: Cáncer del canal anal No 6. Apariencia basaloide
se observa coilocitosis. H&E 200X. 3: Cáncer del canal anal No 1 Un área sin
infiltración con disqueratosis y coilocitosis superficial H&E 150X. 4: VPH de amplio espectro positivo en caso No 7 (WS-
hibridación in situ) 400X. 5 : VPH de alto riesgo en caso No
10 (AR-hibridación in situ) 400X. 6 : VPH de alto riesgo en caso No 8 (AR-hibridación
in situ) inmunomarcaje focal en núcleos basales 800X
Estudiamos la presencia de infección con el virus del papiloma humano
(VPH) en 11 de los 15 casos de mujeres con diagnóstico histológico de cáncer
del canal anal. El VPH fue examinado por hibridación in situ demostró en todos
los casos ser positivo para virus de amplio espectro (WS) y para virus de alto
riesgo (AR). Le dimos especial atención a las
características del marcaje observado entre las dos sondas específicas WS y AR
(DAKO), de modo que las señales de la Biotina se demostraron con el complejo primario
de estreptavidina-peroxidasa,tiamina-biotinilada y secundariamente
estreptavidina-peroxidasa. En todos los casos, la presencia de VPH-AR, se
examinaron nuevamente para la detección de VPH 16, 18 y 31-33. La distribución
del marcaje en las células de los distintos estratos del epitelio se examinó atendiéndole a la apariencia histológica, el grado de
la neoplasia intraepitelial anal (NIA) presente y a las
características invasivas de los carcinomas. Los casos
examinados para VPH de Amplio espectro (WS) y de Alto riesgo (AR) resultaron
todos positivos para ambas sondas. Se examinaron los virus 16, 18 y 31-33, en
casos seleccionados (1, 3, 4, 6, 9 y 11) y todos mostraron positividad para VPH
16 y para VPH 31-33. Dos casos (1 y 9) mostraron solamente VPH 18. En uno de
los casos de carcinoma (caso 11) se observó presencia de inmunomarcaje para
ambos virus 16 y 18. Ver Figura 1 (4, 5 y 6)
Las seis biopsias seleccionadas estudiadas
simultáneamente con hibridación in situ cromogénica para VPH y con Hibridación
Genómica Comparada con sondas centroméricas para varios cromosomas,
correspondieron a los casos 3, 4, 5, 6,
7,y 10. En los casos 3 y 6 no se obtuvieron resultados satisfactorios por
problemas técnicos. Se examinaron 4 casos ( 4, 5, 7, y 10) con resultados
satisfactorios, utilizando las sondas para los cromosomas 3, 17 y 18. Se
detectaron aneuploidías en todos los casos, siendo más evidentes para los
cromosomas 3 y 17. y menos frecuentes en el cromosoma 18. Ver Figuras 2, 3 y 4.
Fig 2: Monosomías, trisomías y tetrasomías del cromosoma 17
Fig 3 : Monosomías y tetrasomías del cromosoma 18
Figura 4 : Trisomías, monosomías y nulisomías del cromosoma 3