Los 38 casos estudiados en este trabajo fueron recibidos para su evaluación histológica e inmunohistoquímica en el Laboratorio de Patología Molecular NOVAPATH, en Caracas, Venezuela, durante el año 2002.

En todos los casos se recibió el material ya incluido en parafina. En algunas ocasiones, fue necesario reincluir en parafina las muestras recibidas en bloques con la finalidad de mejorar la calidad del material o de reorientar las lesiones. Se hicieron nuevos cortes de dos a tres micras y su ulterior procesamiento de rutina. Finalmente, se tiñeron con hematoxilina y eosina, y se examinaron con un microscopio de luz.

Después de la evaluación diagnóstica y cotejados los datos clínicos, se decidió en cada caso particular, hacer el estudio inmunohistoquímico con los anticuerpos adecuados de acuerdo con el diagnóstico diferencial planteado. En algunos casos, antes del estudio inmunohistoquímico, se realizó la coloración de PAS con el reactivo de Schiff usando la digestión con diastasa para la detección del glicógeno. Los cortes de dos a cuatro micras, fueron hechos en un micrótomo rotatorio y recogidos en láminas sialinizadas o recubiertas con poli-l-lisina, previo bloqueo de la peroxidasa endógena con peróxido de hidrógeno-metanol. Se utilizó para la recuperación antigénica una solución de citrato de sodio a pH 6, en una olla de presión dentro de un horno de microondas para elevar la temperatura a 100°C durante varios minutos. Se usó como cámara húmeda un sistema de capilaridad de la casa Shandon y los anticuerpos usados fueron de DAKO a las diluciones correspondientes.

Se examinó cada caso con una serie de anticuerpos de acuerdo con el diagnóstico planteado. De manera general, se utilizaron los siguientes anticuerpos: Queratina 7, Queratina 20, EMA, CEA, Queratina AE1-AE3, Queratina 34Beta E12 (queratina 903), Calretinina, los Receptores de Estrógenos y de Progesterona, Antígeno Prostático Específico, Enolasa Neuronal Específica, Sinaptofisina, la Vimentina, la Proteína S100, el Antígeno Leucocitario Común (CD45), la Fosfatasa Alcalina Placentaria, la Gonadotrofina Coriónica humana, la Tiroglobulina, PGP9.5, el HEP, el CD68, HER 2/neu, Ki 67, CD99, Melan A y HMB45.