Se realizó un estudio descriptivo,
prospectivo, de una muestra seleccionada de casos para establecer la utilidad
de la determinación de los niveles de ADA y sus isoenzimas ADA1 y
ADA2 en el líquido pleural de
pacientes con tuberculosis pleural, tomando como prueba de oro, la presencia de
granulomas con necrosis caseosa, en la biopsia pleural. El proyecto fue aprobado por la comisión de
ética del Hospital “José Ignacio Baldo” (El Algodonal).
Se seleccionaron pacientes hospitalizados en
el servicio de Neumonología del Complejo Hospitalario “Dr. José Ignacio Baldó”
durante con diagnóstico de derrame pleural por examen físico y radiología
convencional de tórax (PA, lateral y/o decúbito lateral), con clasificación de
exudado según los criterios de Light del líquido obtenido por toracocéntesis(10).
Criterios de Inclusión:
·Pacientes
mayores de 15 años, de cualquier sexo.
·Manifestaciones
clínicas y radiológicas compatibles con derrame pleural.
·Sin
contraindicaciones para realizar toracocéntesis y biopsia pleural con aguja.
·Aceptación
a participar en el estudio.
·Pacientes
con patologías cuyo líquido pleural fuera clasificado como exudado.
·Pacientes
que no recibieran terapias con diuréticos, inmunomoduladores e inmunosupresores.
Materiales y Procedimientos:
Después
de completar la historia clínica y de la firma del consentimiento informado, al
paciente se le realizaron Radiografías de tórax (PA, Lateral y/o decúbito
lateral), exámenes de laboratorio (Hematología, Química sanguínea, Serología
para VIH y pruebas de coagulación) y posteriormente una toracocéntesis
diagnóstica, con la técnica estándar(10) Se tomaron muestras del
líquido que se separaron en 4 tubos: un tubo heparinizado (1 unidad de
heparina/ml) para su análisis químico (Laboratorio del hospital Simón Bolívar),
un tubo seco para estudio citológico (Servicio de Anatomía Patológica del Laboratorio de la
Coordinación Nacional de Salud Respiratoria), un tubo seco para estudio
microbiológico y un tubo heparinizado para su traslado al Laboratorio del
Instituto de Biomedicina del Hospital Vargas de Caracas.
Las
muestras a quienes se les determinó ADA estuvieron libres de hemólisis, ya que
los eritrocitos humanos tienen una alta actividad sobre la enzima, para su
procesamiento se centrifugaron x 15 minutos, y el sobrenadante se utilizó para el ensayo.
Determinación de
Adenosin Deaminasa
Se
realizó utilizando el método de Giusti, en el cual la Adenosina, es
transformada por la ADA
en inosina y amoniaco, el amoniaco reacciona con el hipoclorito de sodio y
fenol (con nitropusiato de sodio en medio alcalino como catalizador), para
formar indofenol, que da un color azul que se mide espectofotométricamente.
Estabilidad
de la enzima en las muestras: La actividad de la enzima en la muestra centrifugada
y separada del sedimento fue de 1 día a temperatura ambiente y hasta 10 días a
4º centígrados(21).
Si
el ensayo se realizó después de este tiempo la muestra se almacenó a -20ºC.
Biopsia de
pleura
Posterior a la obtención de los resultados de las pruebas
bioquímicas, se aplicaron los criterios de Light y se realizó biopsia de pleura
a aquellos clasificados como exudados. Se obtuvieron varios fragmentos de la
pleura parietal con la aguja de Abrams,a través de la pared torácica y se enviaron en un tubo con solución
fisiológica para realizar el cultivo para micobacterias (Servicio de Bacteriología del Laboratorio de la Coordinación Nacional
de Salud Respiratoria o del Instituto de Biomedicina del Hospital Vargas) y en
un tubo con formol para estudio anatomopatológico con coloración de
hematoxilina/eosina (Servicio de Anatomía Patológica HJIB).
Tratamiento Estadístico:
Se
aplicó el programa SPSS 13.0, con el fin de obtener valores descriptivos:
Promedios y desviación típica en las variables cuantitativas, y frecuencia con porcentajes en las variablescualitativas. Para realizar la comparación
entre variables cuantitativas se hizo uso de t-student, con el fin de hallar
diferencias estadísticamente significativas y para realizar comparaciones entre
variables cualitativas con cualitativas o cuantitativas (estas agrupadas en
rangos), se utilizó la prueba chi-cuadrado con el fin de hallar asociación
entre las variables relacionadas. La especificidad y sensibilidad, se calculó
según fórmulas establecidas, con el programa Excel de Office XP. Para
establecer significancia estadística se consideró una confiabilidad mayor al 95% (p menor a 0,05).
